基本信息
产品名称 | Uracil-DNA Glycosylase UDG酶 | 货号 | P-PR1122 |
规格 | 1000U、1000U×5 | 用途 | 仅供科研 |
英文名称：Uracil-DNA Glycosylase (UDG)
作用机制：能够特异性识别并水解DNA链中的尿嘧啶碱基与脱氧核糖之间的N-糖苷键，释放游离的尿嘧啶，在DNA链上形成AP位点，进而被AP核酸内切酶切割，最终导致DNA链断裂。可用于去除含dUTP的DNA，防止PCR产物污染，也可用于DNA损伤修复研究。
适用样本：适用于PCR防污染体系、DNA损伤修复研究等实验，样本包括PCR产物、基因组DNA、质粒DNA等。
产品概述
即尿嘧啶-DNA糖基化酶，可特异性识别并切除DNA链中的尿嘧啶碱基，引发DNA链的断裂，从而降解含尿嘧啶的DNA。在分子生物学实验中，主要用于防止PCR产物的交叉污染，通过提前降解可能存在的含尿嘧啶的扩增产物，大幅降低假阳性结果的出现概率，是保障PCR、荧光定量PCR等实验准确性的重要工具。
产品特点
尿嘧啶专一性：特异性识别并切除DNA中的尿嘧啶碱基，形成AP位点
防污染核心工具：降解PCR产物中的尿嘧啶DNA，避免交叉污染
温度特性：37℃发挥活性，95℃处理10分钟完全失活
功能基础：是PCR污染防控体系的核心酶组分，保障实验可靠性
操作步骤
一、样本准备
取1-5mL漱口水样本转移至15mL离心管中，12000rpm离心10分钟，弃上清，收集细胞沉淀。
二、细胞裂解
向离心管中加入200~400μL细胞裂解液，再加入15~20μL蛋白酶K溶液
涡旋震荡10秒充分混匀，将离心管放入75℃恒温震荡器中，900rpm恒温震荡裂解45分钟
裂解完成后短暂离心，将上清液转移至新的离心管中
三、DNA吸附
向裂解上清中加入等体积的结合缓冲液，轻轻颠倒混匀
将混合液全部转移至一次性吸附柱中，12000rpm离心30秒，弃收集管中的废液
向吸附柱中加入500μL漂洗液，12000rpm离心30秒，弃废液；重复此漂洗步骤1次
四、DNA洗脱
将吸附柱放回收集管，12000rpm离心2分钟，彻底去除残留漂洗液
将吸附柱转移至新的1.5mL离心管中，向吸附柱中心加入50~100μL洗脱缓冲液（可预热至65℃提升洗脱效率）
室温静置2分钟，12000rpm离心1分钟，离心管中的液体即为提取完成的基因组DNA
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使用建议
溶解与保存：建议以液体形式保存于-20℃，避免反复冻融。
反应条件：常规反应温度为37℃，灭活需50℃处理5分钟。
推荐用量：根据实验体系优化，通常每50μL反应体系添加0.1-1U。
关键字： Uracil-DNA Glycosyla;
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