基本信息
产品名称 | 2×Fast Taq PCR MasterMix( 含染料 ) | 货号 | P-PR1089 |
规格 | 1ml×5 | 用途 | 仅供科研 |
英文名称：2×Fast Taq PCR MasterMix (with Dye)
作用机制：预混了Fast Taq DNA聚合酶、dNTP、缓冲液和电泳示踪染料，可快速启动PCR反应，缩短扩增时间，示踪染料可直接用于电泳上样，无需额外添加上样缓冲液，提高实验效率。
适用样本：各类DNA模板，包括基因组DNA、cDNA、质粒DNA等，适用于常规快速PCR扩增，产物可直接进行琼脂糖凝胶电泳检测。
产品概述
这是一款预混型的快速PCR反应混合液，包含热稳定的Taq DNA聚合酶、dNTPs、优化的PCR缓冲液以及染料，浓度为2×，可直接与模板DNA和引物混合进行PCR反应。其中的染料可在PCR反应完成后直接进行电泳检测，无需额外添加上样缓冲液，简化实验流程。Fast Taq聚合酶的特性使得PCR扩增速度更快，能在较短时间内获得扩增产物，适用于常规PCR、快速PCR等实验，提高实验效率。
产品特点
快速扩增体系：Fast Taq酶延伸速度可达6kb/min，大幅缩短PCR反应时间
预混便捷：集成Taq酶、dNTP、缓冲液和电泳染料，直接加模板和引物即可反应
染料可视化：含电泳上样染料，PCR产物可直接进行凝胶电泳，无需额外处理
通用性强：适用于各种常规PCR扩增，对不同模板适应性好
操作步骤
一、试剂预处理
取出洗涤液Ⅰ和洗涤液Ⅱ浓缩液，按试剂瓶标注比例加入无水乙醇，充分混匀后备用
将洗脱液置于65℃水浴锅中预热
二、水样处理与核酸富集
取10mL预处理后的水样（杂质较多的水样需先经0.45μm滤膜过滤）加入50mL洁净烧杯
依次加入0.5mL核酸富集因子、5mL病毒裂解液及50μL消化液，充分搅拌混匀
将烧杯置于65℃水浴中孵育15分钟，期间每隔5分钟搅拌一次
三、核酸纯化与洗脱
向烧杯中加入15mL异丙醇，充分搅拌混匀后，将混合液转移至连接富集吸附柱的50mL注射器针筒内
静置2分钟后，开启真空抽滤装置，将液体缓慢抽滤至富集吸附柱内（注意不要抽干）
向针筒内加入5mL洗涤液Ⅰ，静置2分钟后抽滤；再加入5mL洗涤液Ⅱ，静置2分钟后抽滤，重复洗涤液Ⅱ步骤1次
取下富集吸附柱，放入收集管中，12000rpm常温离心3分钟，去除残留洗涤液
将吸附柱转移至新的收集管，加入50-100μL预热的洗脱液，静置2分钟后12000rpm离心2分钟
收集管中的液体即为纯化后的病毒核酸，可直接用于下游实验或-70℃保存
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注意事项
试剂保存：试剂盒应避光保存于2-8℃，有效期12个月；核酸富集因子避免反复冻融，使用后立即放回冰箱
水样预处理：高浊度或杂质过多的水样，需先经0.45μm滤膜过滤，避免堵塞吸附柱
操作规范：实验全程佩戴手套、口罩、护目镜等防护用品，避免直接接触水样与试剂；若不慎接触皮肤或眼睛，立即用大量清水冲洗
试剂配制：洗涤液需现用现配，按比例加入无水乙醇后充分混匀，未使用的稀释液可在2-8℃保存1个月
核酸保存：提取的核酸若长期保存，需置于-70℃环境，避免反复冻融；短期可在4℃保存24小时
器材要求：所有实验器材需为无RNA酶耗材，实验前可经180℃干烤6小时或用RNA酶清除剂处理
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