基本信息
产品名称 | Annealing Buffer for DNA Oligos (10X) | 货号 | P-PR1152 |
规格 | 1ml | 用途 | 仅供科研 |
英文名称：Annealing Buffer for DNA Oligos (10X)
作用机制：一种专为DNA寡核苷酸退火设计的缓冲液，可提供合适的离子强度和pH环境，促进互补的单链DNA寡核苷酸之间的氢键结合，形成稳定的双链DNA结构。
适用样本：单链DNA寡核苷酸引物、探针等，可用于引物退火、探针杂交、DNA双链形成等实验。
产品概述
这是一种10倍浓度的DNA寡核苷酸退火缓冲液，专为DNA寡核苷酸片段的退火反应设计，提供了适宜的离子强度和pH环境，促进互补的单链DNA寡核苷酸高效退火形成双链DNA。它可用于DNA探针的制备、基因克隆中退火步骤的优化、DNA芯片探针的预处理等实验，使用时只需按比例稀释即可为退火反应提供稳定的条件，提升实验的成功率和特异性。
产品特点
优化退火条件：提供适宜的离子强度和pH环境，促进寡核苷酸高效退火
浓度适配：10倍浓缩液，使用时按比例稀释，方便灵活
通用性强：适用于各种DNA寡核苷酸的退火，包括PCR引物、DNA探针等
稳定性好：-20℃可长期保存，反复冻融不影响缓冲液性能
操作步骤
一、实验前准备
向漂洗液1中加入60mL无水乙醇，向漂洗液2中加入45mL无水乙醇，充分混匀后标记
载体RNA溶液配制：向300μg载体RNA冻干粉中加入300μL无酶水，充分溶解后得到1μg/μL的工作液，分装后-20℃保存
将冷冻样本置于室温解冻，轻轻颠倒混匀后备用
二、手工提取流程
样本裂解：取200μL血液样本至1.5mL离心管中，加入20μL蛋白裂解酶、300μL裂解缓冲液，振荡混匀10秒，室温孵育10分钟（每3分钟颠倒混匀1次）
磁珠结合：加入15μL磁珠悬浮液（使用前充分振荡混匀），振荡混匀10秒，室温孵育10分钟（每3分钟颠倒混匀1次）
磁珠分离：将离心管置于磁力架上，静置1-2分钟至磁珠完全吸附，小心吸弃上清液（避免触碰磁珠）
洗涤纯化：
取下离心管，加入500μL漂洗液1，振荡混匀1分钟，再次置于磁力架上分离磁珠，吸弃上清
重复上述操作1次
加入500μL漂洗液2，振荡混匀1分钟，置于磁力架上分离磁珠，吸弃上清
重复上述操作1次
干燥磁珠：保持离心管在磁力架上，室温晾干5-10分钟（确保乙醇完全挥发，避免过度干燥）
核酸洗脱：加入100-200μL洗脱缓冲液，振荡混匀后56℃孵育5分钟，置于磁力架上分离磁珠，上清液即为提取的核酸
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注意事项
实验操作需在洁净环境中进行，佩戴手套、口罩，避免样本交叉污染
蛋白酶K需-20℃保存，使用时避免反复冻融，可分装后使用
还原剂需现用现加，避免长时间暴露于空气中失效
若毛囊样本角质化严重，可适当延长孵育时间或增加还原剂用量
提取的DNA可置于-20℃长期保存，短期可在4℃储存
若需提高DNA产量，可将洗脱液重复洗脱一次吸附柱
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