dATP 100mM

基本信息‌

‌英文名称‌：dATP (100mM)
作用机制：一种高浓度的脱氧腺苷三磷酸，是DNA合成的基本原料之一，在DNA聚合酶的作用下，可连接到DNA链的3'末端，参与DNA链的延伸。 

适用样本：PCR扩增、DNA测序、DNA标记、cDNA合成等所有需要DNA合成的实验体系，可单独添加到反应体系中，补充dATP的含量。
产品概述
这是一种浓度为100mM的脱氧腺苷三磷酸（dATP）溶液，是DNA合成的重要前体物质之一。它经过高纯度合成工艺制备，严格去除DNA酶、RNA酶及内毒素污染，确保PCR、qPCR、DNA测序、cDNA合成等核酸合成类实验的高效性与忠实性。产品可在-20℃长期保存，使用时无需单独配制，直接按实验要求的浓度加入反应体系即可，是分子生物学实验中的基础试剂。
产品特点
高纯度原料：纯度≥99%，无DNase、RNase和内毒素污染

DNA合成底物：作为DNA合成的前体物质，为PCR、测序等实验提供原料

稳定性保障：-20℃可长期保存，反复冻融不易降解

浓度适配：100mM高浓度，可根据实验需求灵活稀释使用
核心PCR试剂及使用方法

1. Taq DNA聚合酶

作用：催化DNA链的延伸，是PCR反应的核心酶

使用方法：

通常按0.5-2U/25μL体系添加，具体用量参照试剂说明书

酶对温度敏感，需在冰上操作，避免反复冻融

最后加入酶液，防止提前激活导致非特异性扩增

2. dNTP混合液

作用：提供DNA合成的原料（dATP、dTTP、dCTP、dGTP）

使用方法：

终浓度一般为200μmol/L每种dNTP，总浓度800μmol/L

避免反复冻融，可分装成小体积储存

注意pH值，过酸或过碱会抑制聚合酶活性

3. PCR缓冲液

作用：提供酶促反应的适宜环境（pH、离子浓度）

使用方法：

通常为10×浓度，使用时稀释至1×终浓度

含Mg²+的缓冲液需注意Mg²+浓度，一般1.5-2.5mmol/L为最优范围

部分缓冲液含KCl、Tris-HCl等成分，无需额外添加

4. 引物（上游/下游）

作用：定位扩增区域，引导DNA合成起始

使用方法：

终浓度一般为0.1-1μmol/L，根据引物Tm值调整

引物需用TE缓冲液或无菌水溶解，浓度计算准确

避免引物降解，-20℃分装储存，避免反复冻融

5. 模板DNA

作用：提供扩增的原始DNA模板

使用方法：

模板浓度一般为1ng-1μg/25μL体系，根据模板类型调整

基因组DNA需充分纯化，避免蛋白、RNA等杂质污染

质粒DNA可适当减少用量，一般10-100ng即可

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实验流程

反应体系配制：按1×工作浓度混合预混液、模板（10-100 ng）、引物（0.2-0.5 μM）及无核酸酶水。

PCR程序：

预变性：95℃ 30 sec

扩增循环（40×）：95℃ 5 sec → 60℃ 30 sec（荧光采集）

熔解曲线分析：60-95℃梯度升温。

注意事项

避免反复冻融，推荐分装保存。

熔解曲线需呈现单一峰以确保扩增特异性。

若需绝对定量，建议配套标准品使用。