基本信息
产品名称 | dCTP 100mM | 货号 | P-PR1148 |
规格 | 0.25ml | 用途 | 仅供科研 |
英文名称:dCTP (100mM)
作用机制:作为DNA合成的原料之一,在DNA聚合酶的作用下,通过碱基互补配对原则结合到新合成的DNA链上,为DNA链的延伸提供胞苷碱基。
适用样本:适用于PCR、real-time PCR、RT-PCR、cDNA合成、引物延伸反应、DNA测序、DNA标记等分子生物学实验中的各类样本,只要实验涉及DNA合成相关步骤即可使用。
产品概述
即脱氧胞苷三磷酸溶液,浓度为100mM,以溶液钠盐形式用超纯水配制,pH值调至7.0,纯度≥99%且无DNase、RNase等污染。它是DNA合成的核心原料之一,可直接用于PCR、实时荧光定量PCR、反转录PCR、cDNA合成、DNA测序与标记等多种常规分子生物学反应,为核酸合成提供关键底物。
产品特点
高纯度核苷酸:纯度≥99%,严格控制核酸酶和内毒素污染
DNA合成核心组分:参与DNA链的延伸,是PCR、qPCR、测序等实验的必需试剂
溶液状态:以水溶液形式提供,使用便捷,无需额外配制
兼容性强:适用于各种DNA聚合酶体系,无序列特异性
操作步骤
.配制反应体系:(以25μl体系为例)
组分 体积
10×反应缓冲液 2.5μl
MgCl₂(25mM) 1.5-2.5μl(根据模板调整)
dNTPs(10mM each) 0.5μl
上游引物(10μM) 1μl
下游引物(10μM) 1μl
模板DNA 1-5μl
3173 DNA Polymerase 0.2-0.5μl
ddH₂O 补至25μl
.PCR扩增:设置循环参数 95℃预变性3min;95℃变性30s,50-65℃退火30s,72℃延伸(1min/kb),25-35个循环;72℃终延伸10min
.产物处理:扩增产物需添加Loading Buffer后进行1%琼脂糖凝胶电泳
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注意事项
试剂预处理:使用前需按照瓶身标签提示,向漂洗液中加入指定体积的无水乙醇
沉淀处理:若裂解液、结合缓冲液出现沉淀,可在37℃水浴中加热溶解,摇匀后再使用
操作环境:实验需在洁净环境中进行,避免样本交叉污染;所有离心步骤均在室温下完成
试剂保存:试剂盒未开封时,可在15~25℃干燥环境下保存12个月;开封后蛋白酶K需置于-20℃保存,避免反复冻融
安全防护:若试剂接触皮肤或黏膜,需立即用大量自来水冲洗
关键字: dCTP 100mM;
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