基本信息
中文名称:快速DNA提取试剂盒(带证,煮沸法)
货号:P-PR1545
规格:25T、50T、100T
英文名称:Rapid DNA Extraction Kit (Certified, Boiling Method)
作用机制:基于煮沸法原理,通过高温煮沸使细胞破裂释放DNA,同时去除部分蛋白质杂质,操作快速简便,产品带证,适用于快速检测场景。
适用样本:毛发、口腔拭子、培养细胞等样本,适用于现场快速检测、初步筛查等。
产品概述
本试剂盒基于煮沸法原理设计,可快速从植物组织、种子、动物组织、血液样品、酵母和细菌等多种样本中提取基因组DNA。整个提取过程无需去蛋白、去RNA及其他次生代谢物处理,无需有机溶剂抽提和无水乙醇沉淀,提取的DNA可直接用于后续PCR扩增、基因检测等分子生物学实验。
产品组成
组分名称 规格 作用说明
裂解液 按需配置 破碎细胞,释放基因组DNA
蛋白酶K(可选) 10mg/ml 降解蛋白质,辅助细胞裂解
RNase A(可选) 10mg/ml 降解样本中的RNA杂质
洗脱缓冲液/无菌去离子水 按需配置 溶解并洗脱纯化后的DNA
离心吸附柱(可选) 按需配置 特异性结合DNA,实现快速纯化
收集管 按需配置 收集洗脱后的DNA溶液
产品特点
操作简单快速:无需液氮研磨和复杂的试剂处理,整个提取过程仅需5-15分钟,可快速获得合格DNA样本
样本兼容性广:适用于植物叶片、种子、动物组织、全血、血凝块、干血斑、酵母、细菌等多种样本类型
结果稳定可靠:试剂预混配置,批次间差异小,确保实验结果重复性
安全性高:避免接触苯酚、氯仿等有毒有机溶剂,保护操作人员健康
下游适用性强:提取的DNA可直接用于PCR扩增、酶切反应、基因测序等多种分子生物学实验
操作步骤
基础煮沸法(通用版)
样本处理:
植物样本:取10-50mg新鲜组织或5-20mg干样,研磨成细粉后转移至离心管
动物组织:取10-30mg组织,剪碎后直接加入离心管
血液样本:取50-200μl全血或血凝块加入离心管
微生物样本:取1-5ml菌液,离心收集菌体后弃去上清
裂解反应:向离心管中加入200-500μl裂解液,剧烈振荡混匀,沸水浴5-10分钟
离心分离:12000rpm离心5分钟,将上清液转移至新的离心管
DNA洗脱:取上清液直接用于下游实验,或加入等体积异丙醇沉淀后,用70%乙醇洗涤,干燥后用洗脱缓冲液溶解
优化纯化版(带离心柱)
完成基础煮沸法步骤1-3,获得上清液
DNA结合:向上清液中加入等体积结合缓冲液,混匀后转移至离心吸附柱,12000rpm离心1分钟,弃去流出液
杂质洗涤:向吸附柱中加入500μl洗涤缓冲液,12000rpm离心30秒,弃去流出液,重复操作1次
干燥吸附柱:空柱12000rpm离心2分钟,彻底去除残留洗涤液
DNA洗脱:向吸附柱中央加入50-100μl洗脱缓冲液,室温静置2分钟后,12000rpm离心2分钟,收集洗脱液即为纯化后的DNA
注意事项
样本处理:
样本应尽量新鲜,若需保存,应置于-80℃低温环境,避免反复冻融
植物样本研磨应尽量充分,以提高DNA提取效率
血液样本若使用抗凝血,应避免使用肝素抗凝剂,以免抑制下游PCR反应
操作规范:
实验过程中应穿戴工作服和乳胶手套,避免样本污染
所有离心步骤建议使用转速≥12000rpm的台式离心机
严格按照操作步骤进行,避免试剂交叉污染
试剂保存:
试剂盒应在室温(15-25℃)干燥条件下保存,有效期12个月
蛋白酶K和RNase A需置于-20℃保存,避免反复冻融
结果判断:
提取的DNA可用琼脂糖凝胶电泳或核酸定量仪检测浓度和纯度
若DNA纯度较低(OD260/OD280<1.6),可增加洗涤步骤或使用RNA酶处理
特殊情况:
富含多糖、多酚的植物样本,可在裂解液中加入2% PVP(聚乙烯吡咯烷酮)以去除杂质
难裂解的细菌样本,可在煮沸前加入溶菌酶(10mg/ml)37℃处理30分钟
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关键字: 快速DNA提取试剂盒(带证,煮沸法);Rapid DNA Extraction;
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