基本信息
中文名称:干血斑DNA快速提取试剂盒
货号:P-PR1498
规格:50T、100T
英文名称:Rapid Dried Blood Spot DNA Extraction Kit
作用机制:采用特殊的提取液溶解干血斑样本,释放其中的DNA,去除血红蛋白等杂质,通过简单的步骤即可快速获得可用于PCR检测的DNA。
适用样本:滤纸干血斑样本。
产品概述
本试剂盒是一款专为干血斑样本设计的DNA提取工具,依托特异性结合DNA的吸附材料与优化缓冲液系统,可高效提取干血斑中的基因组DNA。提取的DNA片段完整、纯度高,能直接用于酶切、PCR扩增、基因测序、芯片杂交等多种分子生物学实验,适配科研、法医检验、疾病筛查等多领域需求。
试剂盒组成(以50次装为例)
组分名称 规格 作用说明
细胞裂解液 15mL 裂解干血斑中的细胞,释放胞内DNA,同时抑制核酸酶活性
结合缓冲液 15mL 创造适宜环境,促使DNA特异性吸附到吸附柱基质上
漂洗液 15mL 去除吸附柱上残留的蛋白、血红素、脂类等杂质,提升DNA纯度
洗脱缓冲液 15mL 为DNA提供低盐环境,使其从吸附柱上洗脱并溶解
蛋白酶K溶液 1mL 降解样本中的蛋白质,助力DNA完全释放
一次性吸附柱 50个 特异性吸附DNA,实现DNA与杂质的分离
2mL收集管 50个 配合吸附柱使用,收集离心过程中产生的废液
1.5mL离心管 50个 用于样本处理、DNA洗脱后的收集与保存
产品特点
样本适配广:可从滤纸干血斑、专用采血卡干血斑等多种类型样本中直接提取DNA
提取效率高:采用硅胶膜吸附或磁珠吸附技术,无需酚/氯仿抽提,1小时内即可完成全部流程
DNA质量优:提取的DNA片段大,OD260/OD280比值可达1.7~1.9,无蛋白、血红素等杂质残留,满足高通量测序等高精度实验需求
操作门槛低:步骤简洁,无需复杂仪器,手工操作即可完成,也适配自动化工作站实现高通量提取
操作步骤
一、样本准备
向1.5mL离心管中加入3~10片直径3mm的干血斑样品(根据样本浓度调整数量,常规取3片即可)。
二、细胞裂解
向离心管中加入200~400μL细胞裂解液,再加入15~20μL蛋白酶K溶液
涡旋震荡10秒充分混匀,将离心管放入75℃恒温震荡器中,900rpm恒温震荡裂解45分钟
裂解完成后短暂离心,将上清液转移至新的离心管中(避免吸入滤纸片)
三、DNA吸附
向裂解上清中加入等体积的结合缓冲液,轻轻颠倒混匀
将混合液全部转移至一次性吸附柱中,12000rpm离心30秒,弃收集管中的废液
向吸附柱中加入500μL漂洗液,12000rpm离心30秒,弃废液;重复此漂洗步骤1次
四、DNA洗脱
将吸附柱放回收集管,12000rpm离心2分钟,彻底去除残留漂洗液
将吸附柱转移至新的1.5mL离心管中,向吸附柱中心加入50~100μL洗脱缓冲液(可预热至65℃提升洗脱效率)
室温静置2分钟,12000rpm离心1分钟,离心管中的液体即为提取完成的基因组DNA
注意事项
试剂预处理:使用前需按照瓶身标签提示,向漂洗液中加入指定体积的无水乙醇
沉淀处理:若裂解液、结合缓冲液出现沉淀,可在37℃水浴中加热溶解,摇匀后再使用
操作环境:实验需在洁净环境中进行,避免样本交叉污染;所有离心步骤均在室温下完成
试剂保存:试剂盒未开封时,可在15~25℃干燥环境下保存12个月;开封后蛋白酶K需置于-20℃保存,避免反复冻融
安全防护:若试剂接触皮肤或黏膜,需立即用大量自来水冲洗
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