Rinbonuclease Inhibitor （RNase酶抑制剂）

基本信息‌

‌英文名称‌：Ribonuclease Inhibitor
作用机制：通过与RNase活性位点结合，抑制其对RNA的降解作用，保护RNA在提取、纯化和后续实验过程中的完整性。

适用样本：适用于各类RNA相关实验，如RT-PCR、RNA纯化、RNA结构研究等，可用于动植物、微生物、临床样本等多种来源的RNA样本。
产品概述
高效的RNA酶抑制剂，可特异性结合并抑制多种RNA酶的活性，避免RNA分子被降解，从而保护RNA的完整性。适用于RNA提取、反转录、RT-PCR、体外转录、RNA电泳等各类涉及RNA的分子生物学实验，确保RNA样品在实验过程中不被破坏，为后续实验的准确性提供保障。
产品特点
广谱抑制活性：高效抑制多种RNA酶（RNase A、B、C、1、T1等）的活性

长效保护：与RNA酶形成稳定复合物，持续抑制RNA酶活性

反应条件兼容：在0-55℃和pH 5.0-8.5范围内均保持活性

实验适配：适用于RNA提取、反转录、RT-PCR、体外转录等所有涉及RNA的实验
核心PCR试剂及使用方法

1. Taq DNA聚合酶

作用：催化DNA链的延伸，是PCR反应的核心酶

使用方法：

通常按0.5-2U/25μL体系添加，具体用量参照试剂说明书

酶对温度敏感，需在冰上操作，避免反复冻融

最后加入酶液，防止提前激活导致非特异性扩增

2. dNTP混合液

作用：提供DNA合成的原料（dATP、dTTP、dCTP、dGTP）

使用方法：

终浓度一般为200μmol/L每种dNTP，总浓度800μmol/L

避免反复冻融，可分装成小体积储存

注意pH值，过酸或过碱会抑制聚合酶活性

3. PCR缓冲液

作用：提供酶促反应的适宜环境（pH、离子浓度）

使用方法：

通常为10×浓度，使用时稀释至1×终浓度

含Mg²+的缓冲液需注意Mg²+浓度，一般1.5-2.5mmol/L为最优范围

部分缓冲液含KCl、Tris-HCl等成分，无需额外添加

4. 引物（上游/下游）

作用：定位扩增区域，引导DNA合成起始

使用方法：

终浓度一般为0.1-1μmol/L，根据引物Tm值调整

引物需用TE缓冲液或无菌水溶解，浓度计算准确

避免引物降解，-20℃分装储存，避免反复冻融

5. 模板DNA

作用：提供扩增的原始DNA模板

使用方法：

模板浓度一般为1ng-1μg/25μL体系，根据模板类型调整

基因组DNA需充分纯化，避免蛋白、RNA等杂质污染

质粒DNA可适当减少用量，一般10-100ng即可

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实验流程

反应体系配制：按1×工作浓度混合预混液、模板（10-100 ng）、引物（0.2-0.5 μM）及无核酸酶水。

PCR程序：

预变性：95℃ 30 sec

扩增循环（40×）：95℃ 5 sec → 60℃ 30 sec（荧光采集）

熔解曲线分析：60-95℃梯度升温。

注意事项

避免反复冻融，推荐分装保存。

熔解曲线需呈现单一峰以确保扩增特异性。

若需绝对定量，建议配套标准品使用。