基本信息
产品名称 | 植物基因组 DNA 提取扩增试剂盒 | 货号 | P-PR1115 |
规格 | 50 次、200 次 | 用途 | 仅供科研 |
英文名称:Plant Genomic DNA Extraction and Amplification Kit
作用机制:针对植物组织富含多糖、多酚等杂质的特点,采用特殊的裂解液和提取流程,有效去除这些杂质,提取得到高质量的植物基因组DNA;配套的扩增试剂可直接用于DNA的PCR扩增,满足后续实验需求。
适用样本:适用于各种植物组织,如叶片、根系、茎秆、果实等,可用于植物基因克隆、转基因检测、分子标记辅助育种等研究。
产品概述
针对植物样本特点优化设计的基因组DNA提取与扩增试剂盒,可有效克服植物组织中多糖、多酚等PCR抑制物的影响,通过独特的裂解和纯化体系,从植物叶片、根茎等组织中提取得到高质量、高纯度的基因组DNA。配套的预混扩增体系能直接对提取的DNA进行高效扩增,适用于植物基因克隆、基因型分析、转基因检测、植物种质资源鉴定等研究。
产品特点
克服植物样本难点:有效去除植物组织中的多糖、多酚等PCR抑制物
高效提取纯化:从植物叶片、根茎等组织中提取高质量、高纯度的基因组DNA
一体化流程:提取的DNA可直接用于后续扩增实验,无需额外处理
适用范围广:适用于各种植物样本的基因克隆、基因型分析、转基因检测等
操作步骤
样本处理:向1.5ml EP管中加入600μl miRNA提取试剂,再加入500μl血清或血浆样本,漩涡振荡30秒充分混匀
初步分离:13000rpm离心5分钟,将上清约1ml转移至新的2ml EP管中,加入1ml异丙醇,上下颠倒混合均匀
柱式吸附:将混合液分三次加入吸附柱(每次约700μl),13000rpm离心15秒,倒掉过柱液
洗涤纯化:
向吸附柱中加入700μl 75%异丙醇,13000rpm离心15秒,倒掉过滤液
向吸附柱中加入500μl无水乙醇,13000rpm离心15秒,倒掉过滤液
干燥柱体:吸附柱13000rpm空离心2分钟,去除残留乙醇,室温放置2分钟使乙醇完全挥发
RNA洗脱:在吸附柱滤芯中央加入30μl RNase-Free TE缓冲液,室温静置2分钟,13000rpm离心2分钟,收集滤液即为提取的miRNA产物
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注意事项
样本处理:
血浆抗凝剂建议使用EDTA或柠檬酸钠,避免使用肝素(会抑制PCR检测)
样本应避免反复冻融,新鲜样本建议尽快处理
试剂使用:
miRNA提取试剂含有胍盐,具有强烈腐蚀性,操作时需佩戴防护眼镜、手套和口罩
自备试剂需确保无RNase污染,避免影响RNA完整性
实验操作:
所有操作需在无RNase环境中进行,使用RNase-Free的枪头和离心管
离心过程需确保离心管盖紧,避免液体渗漏
产物检测:
由于血清/血浆中miRNA含量极低,提取产物浓度通常在5ng/μl以下,难以用常规NanoDrop测量,建议直接取10μl进行下游反转录实验
为获得更可靠数据,推荐使用特异性和灵敏度更好的TaqMan探针法进行miRNA定量检测
产物保存:提取的miRNA产物可立即用于下游实验,或分装后置于-80℃长期保存,避免反复冻融
关键字: 植物基因组 DNA 提取扩增试剂盒;Plant Genomic DNA Ex;
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