基本信息
产品名称 | 15min高产全血基因组DNA提取试剂盒 | 货号 | P-PR1404 |
规格 | 50T | 用途 | 仅供科研 |
英文名称:15min High-Yield Whole Blood Genomic DNA Extraction Kit
作用机制:采用红细胞裂解液去除全血中的红细胞,保留白细胞;利用裂解液裂解白细胞,释放基因组DNA;结合磁珠或硅胶膜吸附技术纯化DNA,整个提取过程仅需15分钟,可获得高产量的基因组DNA。
适用样本:人或动物的全血样本,适用于基因组DNA提取、基因分型、测序等实验。
产品概述
15min高产全血基因组DNA提取试剂盒是一款专门用于从全血样本中快速提取高产基因组DNA的试剂盒,仅需15分钟即可完成提取流程。血液样本中含有大量的血红蛋白、白细胞、血小板等成分,基因组DNA提取面临着杂质去除与DNA完整性保护的挑战。该试剂盒采用了高效的裂解与分离技术,结合特殊的试剂配方,可快速裂解血液细胞,释放基因组DNA,同时有效去除血红蛋白、RNA、蛋白质等杂质,并保护DNA不被降解。它通常采用硅基质膜吸附或磁珠吸附技术,能高效结合基因组DNA,经洗涤与洗脱后获得高产、高纯度的基因组DNA。提取的DNA可直接用于PCR、qPCR、基因测序、基因分型、Southern Blot等多种分子生物学实验,适用于临床样本检测、遗传疾病研究、法医学鉴定等场景,为全血样本的基因组研究提供了高效便捷的解决方案。
产品特点
提取速度快:15分钟内完成全血样本的基因组DNA提取,适合临床样本的快速处理。
产率高:从1ml全血中可提取20-50μg基因组DNA,满足大样本量实验需求。
纯度高:有效去除血红蛋白、RNA等杂质,OD260/280比值在1.7-1.9之间。
完整性好:提取的DNA片段长度可达50kb以上,适用于Southern Blot、长片段PCR等实验。
无需蛋白酶K:采用独特裂解技术,无需蛋白酶K消化,缩短实验时间。
核心PCR试剂及使用方法
1. Taq DNA聚合酶
作用:催化DNA链的延伸,是PCR反应的核心酶
使用方法:
通常按0.5-2U/25μL体系添加,具体用量参照试剂说明书
酶对温度敏感,需在冰上操作,避免反复冻融
最后加入酶液,防止提前激活导致非特异性扩增
2. dNTP混合液
作用:提供DNA合成的原料(dATP、dTTP、dCTP、dGTP)
使用方法:
终浓度一般为200μmol/L每种dNTP,总浓度800μmol/L
避免反复冻融,可分装成小体积储存
注意pH值,过酸或过碱会抑制聚合酶活性
3. PCR缓冲液
作用:提供酶促反应的适宜环境(pH、离子浓度)
使用方法:
通常为10×浓度,使用时稀释至1×终浓度
含Mg²+的缓冲液需注意Mg²+浓度,一般1.5-2.5mmol/L为最优范围
部分缓冲液含KCl、Tris-HCl等成分,无需额外添加
4. 引物(上游/下游)
作用:定位扩增区域,引导DNA合成起始
使用方法:
终浓度一般为0.1-1μmol/L,根据引物Tm值调整
引物需用TE缓冲液或无菌水溶解,浓度计算准确
避免引物降解,-20℃分装储存,避免反复冻融
5. 模板DNA
作用:提供扩增的原始DNA模板
使用方法:
模板浓度一般为1ng-1μg/25μL体系,根据模板类型调整
基因组DNA需充分纯化,避免蛋白、RNA等杂质污染
质粒DNA可适当减少用量,一般10-100ng即可
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实验流程
反应体系配制:按1×工作浓度混合预混液、模板(10-100 ng)、引物(0.2-0.5 μM)及无核酸酶水。
PCR程序:
预变性:95℃ 30 sec
扩增循环(40×):95℃ 5 sec → 60℃ 30 sec(荧光采集)
熔解曲线分析:60-95℃梯度升温。
注意事项
避免反复冻融,推荐分装保存。
熔解曲线需呈现单一峰以确保扩增特异性。
若需绝对定量,建议配套标准品使用。
关键字: 15min高产全血基因组DNA提取试剂盒;15min High-Yield Who;
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