基本信息
产品名称 | Bst 2.0 DNA聚合酶(8U/ul) | 货号 | P-PR1238 |
规格 | 1600U、16KU | 用途 | 仅供科研 |
英文名称：Bst 2.0 DNA Polymerase (8U/ul)
作用机制：具有较强的链置换活性，无需高温变性，在恒温条件下（如60-65℃）即可解开双链DNA，以单链DNA为模板，从引物起始合成新的DNA链，同时置换下游的互补链，常用于环介导等温扩增（LAMP）等等温扩增技术。
适用样本：适用于等温扩增实验，可检测微生物、动植物组织、临床样本等各类样本中的核酸，尤其适用于现场快速检测、缺乏PCR仪的实验场景。
产品概述
一种具有强链置换活性的DNA聚合酶，源自嗜热脂肪芽孢杆菌（Bacillus stearothermophilus）DNA聚合酶的改良版本，无5'-3'核酸外切酶活性。该酶在恒温条件下即可高效催化DNA合成，适用于环介导等温扩增（LAMP）、滚环扩增（RCA）等等温核酸扩增技术，以及DNA测序、分子克隆等实验，8U/ul的浓度保证了其高效的催化活性。
产品特点
强链置换活性：高效置换DNA链，适用于等温扩增技术（LAMP、RCA等）
无5'-3'外切酶活性：不降解DNA片段末端，保证产物完整性
恒温扩增：最适反应温度65℃，无需热循环，实验设备要求低
高活性浓度：8U/ul的浓度，确保高效催化DNA合成
操作步骤
一、实验前准备
向漂洗液1中加入60mL无水乙醇，向漂洗液2中加入45mL无水乙醇，充分混匀后标记
载体RNA溶液配制：向300μg载体RNA冻干粉中加入300μL无酶水，充分溶解后得到1μg/μL的工作液，分装后-20℃保存
将冷冻样本置于室温解冻，轻轻颠倒混匀后备用
二、手工提取流程
样本裂解：取200μL血液样本至1.5mL离心管中，加入20μL蛋白裂解酶、300μL裂解缓冲液，振荡混匀10秒，室温孵育10分钟（每3分钟颠倒混匀1次）
磁珠结合：加入15μL磁珠悬浮液（使用前充分振荡混匀），振荡混匀10秒，室温孵育10分钟（每3分钟颠倒混匀1次）
磁珠分离：将离心管置于磁力架上，静置1-2分钟至磁珠完全吸附，小心吸弃上清液（避免触碰磁珠）
洗涤纯化：
取下离心管，加入500μL漂洗液1，振荡混匀1分钟，再次置于磁力架上分离磁珠，吸弃上清
重复上述操作1次
加入500μL漂洗液2，振荡混匀1分钟，置于磁力架上分离磁珠，吸弃上清
重复上述操作1次
干燥磁珠：保持离心管在磁力架上，室温晾干5-10分钟（确保乙醇完全挥发，避免过度干燥）
核酸洗脱：加入100-200μL洗脱缓冲液，振荡混匀后56℃孵育5分钟，置于磁力架上分离磁珠，上清液即为提取的核酸
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注意事项
实验操作需在洁净环境中进行，佩戴手套、口罩，避免样本交叉污染
蛋白酶K需-20℃保存，使用时避免反复冻融，可分装后使用
还原剂需现用现加，避免长时间暴露于空气中失效
若毛囊样本角质化严重，可适当延长孵育时间或增加还原剂用量
提取的DNA可置于-20℃长期保存，短期可在4℃储存
若需提高DNA产量，可将洗脱液重复洗脱一次吸附柱
关键字： Bst 2.0 DNA聚合酶(8U/ul;Bst 2.0 DNA Polymera;
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