基本信息
产品名称 | Bst 4.0 DNA/RNA聚合酶(32U/ul)无甘油 | 货号 | P-PR1242 |
规格 | 16KU | 用途 | 仅供科研 |
英文名称：Bst 4.0 DNA/RNA Polymerase (32U/ul, without glycerol)
作用机制：具备DNA聚合酶的链置换活性和反转录活性，可直接以RNA为模板合成cDNA并进行等温扩增，同时无甘油配方使其在一些特殊实验体系中表现更优，如冻干制剂制备。
适用样本：适用于RNA样本的等温扩增检测，如新冠病毒等RNA病毒的检测、动植物RNA表达分析等，样本包括鼻咽拭子、动植物组织、细胞等含RNA的样本。
产品概述
无甘油配方的Bst 4.0多功能聚合酶，兼具DNA聚合酶和反转录酶活性，可直接以RNA或DNA为模板进行等温扩增反应，无需额外添加反转录酶，实现一步法反转录-等温扩增。32U/ul的高浓度使其具有高效的催化能力，无甘油成分避免了对反应体系的干扰，适用于RNA病毒检测、基因表达分析等复杂模板的等温扩增实验。
产品特点
多功能聚合酶：兼具DNA聚合酶和反转录酶活性，一步法完成反转录-等温扩增
无甘油配方：避免甘油对反应体系的影响，适用于特殊实验要求
高活性浓度：32U/ul的高浓度，催化效率高，反应速度快
热稳定性好：65℃高温下保持高效活性，适用于复杂模板扩增
操作步骤
一、样本准备
取1-5mL漱口水样本转移至15mL离心管中，12000rpm离心10分钟，弃上清，收集细胞沉淀。
二、细胞裂解
向离心管中加入200~400μL细胞裂解液，再加入15~20μL蛋白酶K溶液
涡旋震荡10秒充分混匀，将离心管放入75℃恒温震荡器中，900rpm恒温震荡裂解45分钟
裂解完成后短暂离心，将上清液转移至新的离心管中
三、DNA吸附
向裂解上清中加入等体积的结合缓冲液，轻轻颠倒混匀
将混合液全部转移至一次性吸附柱中，12000rpm离心30秒，弃收集管中的废液
向吸附柱中加入500μL漂洗液，12000rpm离心30秒，弃废液；重复此漂洗步骤1次
四、DNA洗脱
将吸附柱放回收集管，12000rpm离心2分钟，彻底去除残留漂洗液
将吸附柱转移至新的1.5mL离心管中，向吸附柱中心加入50~100μL洗脱缓冲液（可预热至65℃提升洗脱效率）
室温静置2分钟，12000rpm离心1分钟，离心管中的液体即为提取完成的基因组DNA
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使用建议
溶解与保存：建议以液体形式保存于-20℃，避免反复冻融。
反应条件：常规反应温度为37℃，灭活需50℃处理5分钟。
推荐用量：根据实验体系优化，通常每50μL反应体系添加0.1-1U。
关键字： Bst 4.0 DNA/RNA聚合酶(3;Bst 4.0 DNA/RNA Poly;
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