基本信息
产品名称 | COVID 19-ORF1ab LAMP Primer Set | 货号 | P-PR1260 |
规格 | 50Tx25μl | 用途 | 仅供科研 |
英文名称：COVID 19-ORF1ab LAMP Primer Set
作用机制：针对新冠病毒ORF1ab基因序列设计的特异性引物，包含内引物、外引物和环引物。在Bst聚合酶的作用下，通过环介导等温扩增技术，特异性识别并扩增新冠病毒ORF1ab基因片段，实现对新冠病毒的检测。
适用样本：专门用于检测新冠病毒，适用于鼻咽拭子、痰液、血清等临床样本，也可用于环境样本中新冠病毒的监测。
产品概述
针对新型冠状病毒（COVID-19）ORF1ab基因区域设计的环介导等温扩增（LAMP）引物套装，包含多条特异性引物，可在恒温条件下快速扩增目标基因片段。该引物套装具有高特异性和高灵敏度，能特异性识别COVID-19的ORF1ab基因，适用于COVID-19的快速检测，可在短时间内得到检测结果，适合现场筛查、大规模样本检测等场景。
产品特点
靶点特异性：针对新冠病毒ORF1ab基因区域设计，特异性识别新冠病毒
LAMP适配：适配环介导等温扩增技术，恒温条件下快速扩增
高灵敏度：检测下限低至10拷贝，可快速检测低载量样本
现场检测适配：无需PCR仪，适合现场快速筛查、大规模样本检测
操作步骤
一、实验前准备
向漂洗液1中加入60mL无水乙醇，向漂洗液2中加入45mL无水乙醇，充分混匀后标记
载体RNA溶液配制：向300μg载体RNA冻干粉中加入300μL无酶水，充分溶解后得到1μg/μL的工作液，分装后-20℃保存
将冷冻样本置于室温解冻，轻轻颠倒混匀后备用
二、手工提取流程
样本裂解：取200μL血液样本至1.5mL离心管中，加入20μL蛋白裂解酶、300μL裂解缓冲液，振荡混匀10秒，室温孵育10分钟（每3分钟颠倒混匀1次）
磁珠结合：加入15μL磁珠悬浮液（使用前充分振荡混匀），振荡混匀10秒，室温孵育10分钟（每3分钟颠倒混匀1次）
磁珠分离：将离心管置于磁力架上，静置1-2分钟至磁珠完全吸附，小心吸弃上清液（避免触碰磁珠）
洗涤纯化：
取下离心管，加入500μL漂洗液1，振荡混匀1分钟，再次置于磁力架上分离磁珠，吸弃上清
重复上述操作1次
加入500μL漂洗液2，振荡混匀1分钟，置于磁力架上分离磁珠，吸弃上清
重复上述操作1次
干燥磁珠：保持离心管在磁力架上，室温晾干5-10分钟（确保乙醇完全挥发，避免过度干燥）
核酸洗脱：加入100-200μL洗脱缓冲液，振荡混匀后56℃孵育5分钟，置于磁力架上分离磁珠，上清液即为提取的核酸
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注意事项
实验操作需在洁净环境中进行，佩戴手套、口罩，避免样本交叉污染
蛋白酶K需-20℃保存，使用时避免反复冻融，可分装后使用
还原剂需现用现加，避免长时间暴露于空气中失效
若毛囊样本角质化严重，可适当延长孵育时间或增加还原剂用量
提取的DNA可置于-20℃长期保存，短期可在4℃储存
若需提高DNA产量，可将洗脱液重复洗脱一次吸附柱
关键字： COVID 19-ORF1ab LAMP;
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