基本信息
产品名称 | SUMO 蛋白酶 | 货号 | P-PR1347 |
规格 | 1000U | 用途 | 仅供科研 |
英文名称：SUMO Protease
作用机制：特异性识别并切割SUMO标签与目标蛋白之间的连接位点，去除SUMO标签，获得天然的目标蛋白质，常用于提高重组蛋白的溶解性和稳定性后，去除标签以获得天然蛋白。
适用样本：适用于带有SUMO标签的重组蛋白的纯化后处理，样本为经过亲和层析纯化的SUMO标签融合蛋白溶液。
产品概述
SUMO蛋白酶是一类特异性识别SUMO（小泛素样修饰物）标签并进行切割的蛋白酶，在重组蛋白表达纯化中用于去除SUMO融合标签。SUMO标签能有效增强重组蛋白的可溶性、促进蛋白正确折叠、保护蛋白免受蛋白酶水解并提高稳定性，尤其适用于难表达或易降解蛋白的表达。SUMO蛋白酶可精准识别SUMO标签与目的蛋白之间的特异性序列位点进行切割，切割后目的蛋白仅保留少量氨基酸残基（或无残留），最大程度还原蛋白天然结构与功能。切割后的SUMO标签及蛋白酶可通过亲和层析等方法去除，获得高纯度的目的蛋白，广泛应用于蛋白结构研究、功能分析及工业生产等领域。
产品特点
结构特异性识别：不依赖线性氨基酸序列，特异性识别SUMO标签的三级结构，切割后目的蛋白N端无残留氨基酸。
广谱反应条件：在4-30℃、pH5.5-9.5范围内保持高活性，可耐受0-1M NaCl、0-2M脲等试剂，适配复杂样品。
高酶切效率：酶与底物比例1:100即可实现高效切割，4℃过夜反应即可完成，不破坏目的蛋白结构。
便捷去除：自身带6×His标签，反应后可通过Ni-NTA树脂去除，简化纯化流程。
操作步骤
一、实验前准备
向漂洗液1中加入60mL无水乙醇，向漂洗液2中加入45mL无水乙醇，充分混匀后标记
载体RNA溶液配制：向300μg载体RNA冻干粉中加入300μL无酶水，充分溶解后得到1μg/μL的工作液，分装后-20℃保存
将冷冻样本置于室温解冻，轻轻颠倒混匀后备用
二、手工提取流程
样本裂解：取200μL血液样本至1.5mL离心管中，加入20μL蛋白裂解酶、300μL裂解缓冲液，振荡混匀10秒，室温孵育10分钟（每3分钟颠倒混匀1次）
磁珠结合：加入15μL磁珠悬浮液（使用前充分振荡混匀），振荡混匀10秒，室温孵育10分钟（每3分钟颠倒混匀1次）
磁珠分离：将离心管置于磁力架上，静置1-2分钟至磁珠完全吸附，小心吸弃上清液（避免触碰磁珠）
洗涤纯化：
取下离心管，加入500μL漂洗液1，振荡混匀1分钟，再次置于磁力架上分离磁珠，吸弃上清
重复上述操作1次
加入500μL漂洗液2，振荡混匀1分钟，置于磁力架上分离磁珠，吸弃上清
重复上述操作1次
干燥磁珠：保持离心管在磁力架上，室温晾干5-10分钟（确保乙醇完全挥发，避免过度干燥）
核酸洗脱：加入100-200μL洗脱缓冲液，振荡混匀后56℃孵育5分钟，置于磁力架上分离磁珠，上清液即为提取的核酸
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注意事项
实验操作需在洁净环境中进行，佩戴手套、口罩，避免样本交叉污染
蛋白酶K需-20℃保存，使用时避免反复冻融，可分装后使用
还原剂需现用现加，避免长时间暴露于空气中失效
若毛囊样本角质化严重，可适当延长孵育时间或增加还原剂用量
提取的DNA可置于-20℃长期保存，短期可在4℃储存
若需提高DNA产量，可将洗脱液重复洗脱一次吸附柱
关键字： SUMO 蛋白酶;SUMO Protease;
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