【产品介绍】 EvaBio™ mRNA Transfection Reagent II 是一款体内专用型基因转染试剂,可通过肌肉注射 的方式将mRNA递送传送至体内并在注射部位高效表达目的蛋白。与其它mRNA专用体内转染试剂相 比 ,具有操作便捷、体内毒性低、稳定性好、体内转染效率及蛋白表达量高等优点。 【体内转染步骤】 以体重20g小鼠,mRNA注射器10ug为例,参考表1调整,步骤如下: ① 试剂准备: 按照表1用量首先取30ul EvaBio™ mRNA Transfection Reagent II (ET0503)放 置于样品管中; ② 复合物制备: 取10ul的mRNA (浓度为1ug/ul)与转染试剂进行直接复合 ③ 20min:室内静置20分钟 ④ 补加葡萄糖注射液:取80ul的葡萄糖注射液加入到上面复合物溶液中, ⑤ 通过肌肉注射的方式 ,注射于鼠体内 ,6-24小时后检测mRNA在鼠体内的蓄积或表达。 体内转染条件的优化: 可通过改变mRNA的用量和浓度以及EvaBio™ mRNA Transfection Reagent II 浓度对体内分 布或蛋白表达情况进行优化。EvaBio™ mRNA Transfection Reagent II (µL): mRNA(µg)可以在4:1 和2:1之间调整。根据鼠体重的不同 ,葡萄糖注射液的补加体积可以在推荐量±30µL之间调节。优化方 法参考表2。使用荧光标记mRNA的活体分布实验,建议在注射后4-6小时开始检测 ,荧光素酶标记 mRNA的活体分布实验 ,建议在注射后6小时开始检测。
表1.不同体重鼠的体内用量推荐
表2.体重20g鼠的优化复合方式推荐
【储存条件及保质期】 2-8℃保存 ,有效期12个月 【适用范围】 EvaBio™ mRNA Transfection Reagent II 转染试剂可被应用于mRNA疫苗研发或基因治疗等相 关工作的研究中。可用于递送荧光标记的mRNA或具有特殊功能的mRNA,并在体内高效表达。可满 足基础科研、初期工艺开发及临床前实验研究使用。 【注意事项】 1.本产品仅限于科学实验研究使用 ,不得用于临床诊断、治疗等领域。 2.细胞状态:使用健康、低代数的细胞 ,状态差会显著降低转染效率。 3. 无菌操作:全程在超净台内操作,避免污染。 4. 试剂保存:转染试剂需 2-8℃或-20℃避光保存** ,避免反复冻融。 5. 血清影响:部分转染试剂需在无血清条件下进行 ,转染后可补加血清。 6. 毒性控制:若细胞死亡明显 ,可减少试剂用量或缩短复合物作用时间
伊娃(苏州)生物科技有限公司
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晨曦