【产品介绍】
EvaBio™ LTV transfection reagent 是一款性能优良的质粒DNA转染试剂 ,可以高效转染分 子量较大的病毒质粒 ,适用于慢病毒、腺相关病毒等病毒的包装 ,提高病毒产量 ,与其它转染试剂相 比,具有不受血清影响、转染效率高,细胞毒性低、操作便捷 ,结果稳定可重复性等优点。
【慢病毒包装步骤】 以3质粒系统 ,6孔板为例 ,请参考表1的转染规模调整,步骤如下: ① 细胞接种: 293T细胞接种于6孔板,每 孔 接 种1.0~2.0×10 5个细胞 ,细胞培养12~24小时, 使转染时细胞密度达到60~70%融合度; ② 质粒DNA稀释: 将3µg包装质粒psPAX2,1ug包膜质粒pMD2G和4ug目的基因质粒用Opti-MEM 培养基稀释 ,稀释后的终体积为50µL ③ 转染试剂稀释: 取8μL的EvaBio™ LTV transfection reagent(ET0603)加入到42μL的 Opti-MEM培养基中 ,稀释后的终体积为50µL; ④ 复合物制备:将上述质粒DNA稀释液和转染试剂稀释液混合 ,轻轻吹打均匀后 ,室温静置10分钟; ⑤ 转染:将上述100ul复合物加入到6孔板中 ,轻轻吹打混匀 ,转染6-12h,更换成新鲜的细胞培养液 ,继续培养; ⑥慢病毒收集:转染48h,收集第一批含有慢病毒的细胞培养液上清 ,再加入新鲜的 2ml新鲜2ml新 鲜细胞培养液 ,24-48h后收集第二批含有慢病毒的细胞培养液上清; ⑦离心 :3000rpm,4°C离心5min,将上清液转入新的无菌离心管中保存 ,用于后续纯化和感染。
慢病毒包装实验优化: 可通过改变细胞密度、pDNA的浓度 ,几种构建慢病毒pDNA之间的配比以 EvaBio™ LTV Transfection Reagent (ET0603)浓度对慢病毒包装实验进行优化。保证细胞融合 度在60%以上,EvaBio™ LTV Transfection Reagent (ET0603) (µL): DNA (µg,pDNA总质量)可 以在1:1和3:1之间调整。
不同培养板所需转染试剂和DNA的用量

【储存条件及保质期】 2-8℃保存 ,有效期12个月
【适用范围】 EvaBio™ LTV transfection reagent 适用于慢病毒、腺相关病毒等病毒的包装,提高病毒产量。
【注意事项】 1.本产品仅限于科学实验研究使用 ,不得用于临床诊断、治疗等领域。 2.细胞状态:使用健康、低代数的细胞 ,状态差会显著降低转染效率。 3. 无菌操作:全程在超净台内操作,避免污染。 4. 试剂保存:转染试剂需 2-8℃或-20℃避光保存 ,避免反复冻融。 5. 血清影响:部分转染试剂需在无血清条件下进行 ,转染后可补加血清。 6. 毒性控制:若细胞死亡明显 ,可减少试剂用量或缩短复合物作用时间
关键字: LTV转染试剂(慢病毒);LTV转染试剂;LTV;转染试剂;慢病毒;
EvaCell 品牌隶属香港伊娃集团(HONGKONG EVA HOLD-INGS LIMITED)(香港公司造带1002562)旗下生命科学板块,集团涵盖国际贸易、投资、高级时装名表、生命科学、艺术投资等产是香港老牌集团公司。集团整合全球优质资源供链,结合国内外先进生物技术与产品,为广大的利码医疗及生物界提供优质产品与服务!
伊娃(苏州)生物科技有限公司为EvaCell 品牌中国大陆区独家总经销,负责国内该品牌运营、产品销售及售后。伊娃(苏州)生物科技有限公司是一家集医药研发、科研试剂研发、生产、销售于一体的新型科创公司!