基本信息
中文名称：微生物核酸提取试剂盒
货号：P-PR1482
规格：50T、100T
英文名称：Microbial Nucleic Acid Extraction Kit
作用机制：采用化学裂解/酶解方式破碎微生物细胞壁/膜，释放核酸；通过磁珠吸附/离心柱过滤技术特异性结合核酸，去除多糖、脂类、蛋白质等杂质；针对不同微生物的细胞壁结构优化裂解体系，兼顾革兰氏阳性/阴性菌、真菌等样本的核酸提取效率。
适用样本：细菌、真菌、衣原体、支原体等培养物或临床样本中的微生物
产品概述
本试剂盒基于磁珠特异性结合核酸的原理，可从血液、拭子、痰液、粪便、动植物组织等多种样本中，高效提取、富集、纯化细菌、真菌、病毒等微生物的核酸。提取产物纯度高、完整性好，可直接用于PCR、荧光定量PCR、基因测序、分子杂交等下游分子生物学实验，也可支持临床体外检测相关需求。
试剂盒组成
组分名称 规格 保存条件 作用
裂解液 50ml 室温（15-25℃） 裂解样本，释放微生物核酸
磁珠悬浮液 10ml -20℃冷冻保存 特异性结合核酸分子
洗涤液1 100ml 室温（15-25℃） 去除蛋白质、多糖等杂质
洗涤液2 100ml 室温（15-25℃） 去除盐离子、有机溶剂残留
洗脱液 20ml 室温（15-25℃） 洗脱磁珠上结合的核酸
蛋白酶K 1ml（20mg/ml） -20℃分装保存 降解蛋白质，辅助核酸释放
产品特点
高效提取：采用专利技术可100%去除腐植酸等PCR抑制因子，从高腐植酸的土壤、粪便等复杂环境样本中，也能提取出高质量微生物核酸
快速操作：仅需30分钟即可完成250mg土壤样本的核酸提取，大幅缩短实验周期
广泛兼容：适配血液、拭子、痰液、动植物组织等多种样本类型，同时支持手工操作与自动化提取仪，满足不同实验通量需求
结果稳定：提取产物纯度高、完整性好，可直接用于所有PCR、QPCR等下游实验，重复性强、一致性高
操作步骤
一、手工操作流程（以1.5ml离心管为例）
样本裂解：取200μl预处理后的样本至离心管中，加入600μl裂解液和20μl蛋白酶K，涡旋混匀后56℃孵育10-15分钟，期间每5分钟振荡一次，直至样本完全裂解
核酸结合：向裂解液中加入30μl充分混匀的磁珠悬浮液，涡旋振荡1分钟，室温放置5分钟，使磁珠与核酸充分结合
磁分离：将离心管置于磁力架上，静置1-2分钟，待磁珠完全吸附后，小心吸弃上清（避免触碰磁珠）
洗涤纯化：
加入700μl洗涤液1，涡旋振荡1分钟，磁力架吸附1分钟后吸弃上清
加入700μl洗涤液2，涡旋振荡1分钟，磁力架吸附1分钟后吸弃上清
重复洗涤液2洗涤步骤一次，最后尽量吸净残留液体
干燥磁珠：室温开盖干燥5-10分钟，确保磁珠无明显乙醇残留（避免过度干燥）
核酸洗脱：加入50-100μl洗脱液，涡旋振荡1分钟，65℃孵育5分钟，磁力架吸附2分钟，将上清转移至新的离心管中，即得到纯化的微生物核酸
二、自动化操作流程
取出试剂盒平衡至室温，按仪器要求将裂解液、磁珠悬浮液、洗涤液1、洗涤液2、洗脱液分别加入试剂槽对应位置
将预处理后的样本加入96孔深孔板样本孔，每孔加入20μl蛋白酶K
根据样本类型和仪器型号设置程序参数（参考裂解56℃/40分钟、结合室温/5分钟、洗涤室温/3分钟×2次、干燥37℃/8分钟、洗脱65℃/5分钟）
将96孔深孔板放入仪器，启动提取程序，程序完成后收集洗脱孔中的核酸样本
注意事项
样本处理：样本应新鲜采集或-80℃低温保存，避免反复冻融；处理样本时需全程佩戴手套、口罩，避免交叉污染
试剂使用：磁珠悬浮液使用前需充分涡旋混匀，避免磁珠沉淀；洗涤液使用前需确认已按说明书加入无水乙醇
操作环境：实验需在无核酸酶环境中进行，使用无RNase/DNase的移液器吸头和离心管
洗脱调整：洗脱液体积可根据实验需求调整，体积越小核酸浓度越高，但回收率会有所降低
安全防护：实验过程中需避免试剂接触皮肤和黏膜，若不慎接触请立即用大量清水冲洗
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