基本信息
中文名称:磁珠法通用微生物核酸提取试剂盒 (预装)
货号:P-PR1529
规格:64T
英文名称:Magnetic Bead-based Universal Microbial Nucleic Acid Extraction Kit (Pre-loaded)
作用机制:针对微生物(细菌、真菌等)的细胞壁和细胞膜结构设计裂解液,充分释放核酸,磁珠特异性结合核酸后,通过洗涤去除杂质,最终获得纯净的微生物核酸。
适用样本:粪便、尿液、痰液、环境样本等中的微生物样本。
产品概述
本试剂盒采用磁珠纯化技术,可从多种样本中高效提取包括病毒、支原体、细菌、真菌等在内的微生物核酸。提取过程无需酚氯仿抽提及醇类沉淀,所得核酸纯度高、完整性好,可直接用于PCR、qPCR、二代测序等下游实验。
适用样本类型:
临床样本:全血、血浆、血清、痰液、肺泡灌洗液、脑脊液、宫颈拭子等
环境样本:水体、土壤、空气拭子等
食品样本:生鲜食品、加工食品表面拭子等
产品特点:
高效裂解:化学法与机械法结合,有效裂解难破壁微生物(如葡萄球菌、真菌)
快速提取:病毒样本35分钟内完成提取,细菌/真菌样本40分钟内完成
自动化兼容:适配主流磁棒式/抽吸式核酸提取仪,支持96孔高通量操作
安全环保:全程无需接触有毒试剂,实验操作更安全
检验原理
利用磁珠在高盐低pH环境下吸附核酸、低盐高pH环境下释放核酸的特性,通过以下步骤完成纯化:
裂解:样本经裂解液处理后,细胞结构破坏,核酸游离释放
结合:调节体系盐浓度和pH值,使核酸特异性结合到磁珠表面
洗涤:通过洗涤液去除蛋白质、多糖、酶抑制剂等杂质
洗脱:在低盐高pH条件下,核酸从磁珠表面解离,得到纯化核酸
试剂组成(以96人份预装试剂盒为例)
组分名称 规格 功能说明
裂解液 200mL 裂解细胞,释放核酸
磁珠悬液 10mL 特异性吸附核酸
洗涤液Ⅰ 300mL 去除大部分蛋白质和杂质
洗涤液Ⅱ 300mL 去除盐离子和残留小分子杂质
洗脱液 100mL 解离磁珠上的核酸,得到纯品
预处理液(可选) 50mL 特殊样本(如痰液)前处理
预装说明:所有试剂均预先分装至对应深孔板,可直接上机使用,无需手动分装,减少污染风险。
操作步骤
一、手工操作流程
样本准备
液体样本:直接取200μL样本至离心管
拭子样本:将拭子放入1mL生理盐水,充分洗脱后取200μL上清
痰液样本:加入等体积预处理液,涡旋振荡10分钟后取200μL
裂解结合
加入200μL裂解液,涡旋混匀,65℃水浴10分钟
加入10μL磁珠悬液和400μL结合液(含于裂解液体系),充分混匀后室温静置5分钟
将离心管置于磁力架上,吸附磁珠2分钟,小心吸弃上清
洗涤纯化
加入500μL洗涤液Ⅰ,涡旋重悬磁珠,磁力架吸附2分钟,吸弃上清
加入500μL洗涤液Ⅱ,涡旋重悬磁珠,磁力架吸附2分钟,吸弃上清
重复洗涤液Ⅱ步骤1次,最后吸弃残留液体,室温干燥磁珠3-5分钟
洗脱核酸
加入50-100μL洗脱液,涡旋重悬磁珠,65℃水浴5分钟
磁力架吸附2分钟,将上清转移至新离心管,即为纯化核酸
二、自动化操作流程
将预装试剂板和样本板放入核酸提取仪
选择对应试剂盒的提取程序(仪器自带或自定义)
启动程序,全程自动完成裂解、结合、洗涤、洗脱步骤
程序结束后,从洗脱孔收集纯化核酸
结果判断与质量控制
核酸浓度检测:使用紫外分光光度计检测,OD₂₆₀/OD₂₈₀比值应在1.7-2.0之间
琼脂糖凝胶电泳:基因组DNA应呈现清晰条带,无明显降解
PCR验证:以内参基因(如16S rRNA)为模板进行扩增,应得到预期条带
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