基本信息
中文名称:小核酸转染试剂
货号:P-PR1412
规格:0.5ml、1.0ml、1.5ml
英文名称:Small Nucleic Acid Transfection Reagent
作用机制:带正电荷的试剂分子与带负电荷的小核酸(siRNA/miRNA等)通过静电作用形成复合物,该复合物可被细胞内吞/胞饮作用摄取;进入细胞后,复合物在内涵体中解离,释放小核酸分子,使其靶向结合mRNA或调控基因表达,实现基因沉默或功能调控。
适用样本:哺乳动物细胞系(贴壁细胞、悬浮细胞)、原代细胞等
产品概述
小核酸转染试剂是一种专门用于递送200bp以内小分子RNA(包括siRNA、miRNA mimics、miRNA inhibitor等)的生物试剂,是开展基因沉默、基因功能研究等实验的关键工具。它能有效将外源小核酸导入细胞内,使细胞表达特定的基因沉默效果,广泛应用于生命科学基础研究、药物靶点筛选等领域。
产品组成
小核酸转染试剂主体液:核心活性成分,负责包裹小核酸并介导其进入细胞
转染增强剂(部分产品配套):优化转染环境,提升转染效率
使用说明书:详细操作指引与实验注意事项
产品特点
超高转染效率:部分产品在贴壁细胞中转染阳性率可达95%以上,基因抑制效率最高能达到95%,可媲美国际同类高端产品
极低细胞毒性:采用可降解生物纳米材料,转染后细胞死亡率仅约5%,与正常培养细胞死亡率基本一致,避免因细胞死亡影响实验结果
操作便捷性强:无需额外购买特殊无血清培养基,可直接在含血清培养基中操作;转染后6-8小时无需换液,降低实验操作难度与细胞损伤风险
细胞适用范围广:适用于绝大多数贴壁细胞株,包括常见的293T、A549、HEK293、HeLa、MCF-7等细胞系,部分优化产品可支持原代细胞和悬浮细胞转染
血清兼容性好:血清对转染效果无明显影响,无需刻意更换或调整培养基成分,减少实验步骤与误差
操作步骤
贴壁细胞常规转染步骤:
细胞铺板:转染前1天,将细胞接种到培养板中,调整细胞密度使转染时汇合度达到30%-70%
复合物制备:
取适量小核酸转染试剂,加入适量培养基(无需无血清)
加入对应量的小核酸(建议终浓度10-50nM),轻轻混匀
室温孵育10-20分钟,形成转染复合物
转染处理:将转染复合物直接加入含培养基的细胞培养板中,轻轻摇晃混匀
培养观察:转染后继续培养24-72小时,即可进行后续检测(如qRT-PCR、Western Blot等)
特殊细胞转染注意事项:
原代细胞:建议使用针对原代细胞优化的专用转染试剂,调整细胞接种密度与转染试剂用量
悬浮细胞:需适当提高转染试剂与核酸比例,可采用离心辅助转染法提升效率
注意事项
试剂储存:未开盖试剂建议-20℃避光保存,避免反复冻融;开盖后可4℃短期保存(1个月内)
细胞状态:转染时细胞状态需良好,避免使用传代过多、汇合度过高或有污染的细胞
用量优化:不同细胞系可能需要优化转染试剂与小核酸的比例,建议先进行预实验确定最佳用量
安全防护:操作时需佩戴手套、口罩等防护用品,避免直接接触试剂
实验对照:建议设置阴性对照(如无义siRNA)和阳性对照,确保实验结果的可靠性
时效性:转染复合物需在制备后30分钟内使用,避免长时间放置影响活性
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关键字: 小核酸转染试剂;Small Nucleic Acid T;
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