基本信息
中文名称：中大量血液RNA提取试剂盒
货号：P-PR1459
规格：40T、80T
英文名称：Medium-to-large Scale Blood RNA Extraction Kit
作用机制：针对大体积血液样本，采用红细胞裂解液去除红细胞，保留白细胞；用含胍盐的裂解液破碎白细胞，释放总RNA；结合硅胶膜离心柱或磁珠技术，高效吸附RNA并去除血红蛋白、DNA等杂质，洗脱后获得微克级高完整性总RNA，满足测序、芯片分析等下游需求。
适用样本：人/动物大体积全血样本（≥5ml）
产品概述
本试剂盒采用异硫氰酸胍-酚抽提法结合硅胶柱纯化技术，可从新鲜或冷冻的全血样本中高效提取中大量高纯度总RNA。提取的RNA完整性好、纯度高，无DNA和蛋白质污染，可直接用于RT-PCR、qPCR、Northern杂交、芯片分析、高通量测序等下游实验。
产品组成
组分名称 规格（20次装） 功能说明
裂解液 500mL 裂解细胞，释放RNA，抑制核酸酶
氯仿-异戊醇混合液 200mL 分离RNA与蛋白质、DNA
异丙醇 300mL 沉淀RNA
75%乙醇 500mL 洗涤RNA沉淀，去除盐离子
RNA洗脱液 100mL 溶解纯化的RNA
DNase I 2mL 降解残留的DNA杂质
硅胶纯化柱 20个 特异性吸附RNA
50mL收集管 20个 收集纯化过程中的流出液
产品特点
高得率：从10-20mL全血样本中可提取500-1500μg总RNA，满足大量实验需求
高纯度：OD₂₆₀/OD₂₈₀比值在1.9-2.1之间，无DNA和蛋白质污染
完整性好：提取的RNA可通过琼脂糖凝胶电泳检测到清晰的28S和18S条带
操作便捷：整个提取过程约2.5小时，无需复杂的实验操作
操作步骤
样本处理：取10-20mL新鲜全血样本，加入等体积的裂解液，充分混匀，室温静置10分钟
相分离：加入0.2倍体积的氯仿-异戊醇混合液，剧烈震荡15秒，室温静置3分钟，4℃下12000g离心15分钟
RNA沉淀：将上层水相小心转移至新离心管，加入等体积的异丙醇，充分混匀，-20℃静置30分钟，4℃下12000g离心15分钟，弃上清
RNA洗涤：加入10mL预冷的75%乙醇，轻轻洗涤RNA沉淀，4℃下8000g离心5分钟，弃上清，重复洗涤一次
干燥溶解：室温干燥RNA沉淀5-10分钟，加入500-1000μL RNA洗脱液，65℃水浴10分钟，充分溶解RNA
DNA去除：向RNA溶液中加入DNase I，37℃水浴30分钟，降解残留的DNA杂质
RNA纯化：将处理后的RNA溶液通过硅胶纯化柱，按照试剂盒说明书完成后续的结合、洗涤和洗脱步骤，获得高纯度总RNA
注意事项
实验全程需佩戴无RNA酶的手套和口罩，使用无RNA酶的耗材，避免RNA酶污染
样本需新鲜处理或-80℃低温保存，避免RNA降解
裂解液和氯仿-异戊醇混合液具有刺激性，操作时需在通风橱中进行
干燥RNA沉淀时避免过度干燥，否则会导致RNA难以溶解
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