基本信息
中文名称:凝血块RNA提取试剂盒
货号:P-PR1496
规格:50T、100T
英文名称:Clot RNA Extraction Kit
作用机制:针对凝血块的致密结构设计裂解液,充分破碎凝血块,释放其中的RNA,同时去除凝血因子、血红蛋白等杂质,保护RNA不被降解,最终获得高纯度的RNA。
适用样本:血液凝固形成的凝血块样本。
产品概述
本试剂盒专为凝血块样本设计,采用硅基质吸附柱结合独特缓冲液系统,可高效提取凝血块中的总RNA。提取的RNA纯度高、完整性好,能有效去除基因组DNA、蛋白、血红素等抑制剂,可直接用于RT-PCR、RT-qPCR、Northern Blot、二代测序等下游分子生物学实验。整个操作流程简便快速,可在1小时内完成批量样本处理。
产品组成
组分名称 规格 保存条件
裂解液 LB 50ml 室温(15~30℃)
去蛋白液 PL 30ml 室温(15~30℃)
漂洗液 W* 27ml 室温(15~30℃)
RNase-Free 水 13ml -20℃冷冻保存
RNA 吸附柱及收集管 50套 室温(15~30℃)
RNase-Free 离心管(1.5ml) 50个 室温(15~30℃)
注:首次使用前需在漂洗液W中加入4倍体积无水乙醇,充分混匀后使用
产品特点
高效专一吸附:采用新型硅基质材料,可特异性结合RNA,最大限度去除蛋白、血红素等杂质
DNA污染控制:通过优化裂解体系和吸附条件,有效避免基因组DNA污染,无需额外DNase I消化
高得率高纯度:A260/A280比值可达1.8-2.0,RNA完整性好,可直接用于各种下游实验
操作简便快速:无需酚氯仿抽提,整个提取流程仅需约1小时,可同时处理多个样本
安全无毒:不含有毒有机溶剂,实验过程更安全环保
样本适用性广:适用于新鲜、冷冻或保存于抗凝剂中的凝血块样本
操作步骤
一、样本预处理
取250μL凝血块样本转移至1.5mL RNase-free离心管中
加入750μL裂解液LB,反复吹打并剧烈振荡混匀
加入200μL氯仿(自备),剧烈振荡15秒充分混匀
4℃,12,000rpm离心10分钟,使样本分层
吸取上层水相(约500μL)转移至新的1.5mL RNase-free离心管中
二、RNA提取纯化
将RNA吸附柱套入2mL收集管中,备用
向上层水相中加入500μL去蛋白液PL,充分混匀
将混合液全部加入RNA吸附柱中,12,000rpm离心30秒,弃废液
向吸附柱中加入500μL漂洗液W*,12,000rpm离心30秒,弃废液
重复步骤4一次
将吸附柱放回收集管,12,000rpm空柱离心2分钟,彻底去除残留漂洗液
将吸附柱转移至新的1.5mL RNase-free离心管中,在吸附膜中央加入30-50μL RNase-Free水
室温放置2分钟,12,000rpm离心1分钟,收集滤液即为RNA溶液
注意事项
RNase污染预防:
使用无RNase的塑料制品和枪头,避免交叉污染
操作人员需佩戴一次性口罩和手套,实验过程中勤换手套
所有溶液配制需使用RNase-free水
样本处理:
样本应避免反复冻融,否则会影响RNA完整性和得率
凝血块样本需充分液化后再进行提取,建议使用专用液化柱
试剂使用:
首次使用前务必在漂洗液W*中加入4倍体积无水乙醇
裂解液LB和去蛋白液PL含有刺激性物质,操作时需注意防护
如发现试剂有析出或浑浊,可37℃温浴复溶至澄清后使用
各试剂使用后应及时盖紧盖子,避免长时间暴露于空气中
离心操作:
所有离心步骤均在室温完成,使用可达到12,000rpm转速的台式离心机
确保离心过程中离心管盖紧,避免液体渗漏
RNA保存:
提取的RNA可立即用于下游实验,或分装后置于-80℃长期保存
避免RNA样本反复冻融,建议按需分装保存
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关键字: 凝血块RNA提取试剂盒;Clot RNA Extraction ;
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