基本信息
产品名称 | 50bp Ladder (for PAGE)分子量标准 | 货号 | P-PR1192 |
规格 | 200次(250ul×4支) | 用途 | 仅供科研 |
英文名称:50bp Ladder (for PAGE) Molecular Weight Marker
作用机制:由一系列长度为50bp倍数的DNA片段组成,在聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)中作为分子量标准,用于判断未知DNA片段的大小;可通过与未知DNA片段的迁移率比较,确定其分子量。
适用样本:PCR产物、酶切产物等小分子DNA片段的PAGE电泳分析。
产品概述
50bp Ladder(for PAGE)是一种用于聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)的DNA分子量标准品,由一系列已知分子量的双链DNA片段组成,片段大小通常以50bp为梯度递增(如50bp、100bp、150bp、200bp……直至1000bp或更大)。它专门适用于PAGE电泳,因为PAGE凝胶的分辨率较高,可有效分离小分子量的DNA片段。在DNA片段分析、寡核苷酸合成验证、小片段PCR产物鉴定等实验中,将50bp Ladder与样本一起进行PAGE电泳,通过比较样本条带与Ladder条带的迁移位置,可准确确定样本中DNA片段的分子量大小。该分子量标准品条带清晰、亮度均匀,便于观察与比对,为PAGE电泳中DNA片段的分子量判定提供了准确可靠的参考。
产品特点
分辨率高:专为聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)设计,可精确分辨50bp梯度的DNA片段。
片段范围广:包含50bp、100bp、150bp……1000bp等多个DNA片段,覆盖常用小片段范围。
条带清晰:各条带浓度均匀,亮度一致,易于观察和比对。
稳定性好:经过特殊处理,常温下可稳定保存,反复冻融不影响条带质量。
使用方便:预染色或非预染色可选,直接上样即可,无需额外染色步骤。
操作步骤
一、试剂预处理
取出洗涤液Ⅰ和洗涤液Ⅱ浓缩液,按试剂瓶标注比例加入无水乙醇,充分混匀后备用
将洗脱液置于65℃水浴锅中预热
二、水样处理与核酸富集
取10mL预处理后的水样(杂质较多的水样需先经0.45μm滤膜过滤)加入50mL洁净烧杯
依次加入0.5mL核酸富集因子、5mL病毒裂解液及50μL消化液,充分搅拌混匀
将烧杯置于65℃水浴中孵育15分钟,期间每隔5分钟搅拌一次
三、核酸纯化与洗脱
向烧杯中加入15mL异丙醇,充分搅拌混匀后,将混合液转移至连接富集吸附柱的50mL注射器针筒内
静置2分钟后,开启真空抽滤装置,将液体缓慢抽滤至富集吸附柱内(注意不要抽干)
向针筒内加入5mL洗涤液Ⅰ,静置2分钟后抽滤;再加入5mL洗涤液Ⅱ,静置2分钟后抽滤,重复洗涤液Ⅱ步骤1次
取下富集吸附柱,放入收集管中,12000rpm常温离心3分钟,去除残留洗涤液
将吸附柱转移至新的收集管,加入50-100μL预热的洗脱液,静置2分钟后12000rpm离心2分钟
收集管中的液体即为纯化后的病毒核酸,可直接用于下游实验或-70℃保存
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注意事项
试剂保存:试剂盒应避光保存于2-8℃,有效期12个月;核酸富集因子避免反复冻融,使用后立即放回冰箱
水样预处理:高浊度或杂质过多的水样,需先经0.45μm滤膜过滤,避免堵塞吸附柱
操作规范:实验全程佩戴手套、口罩、护目镜等防护用品,避免直接接触水样与试剂;若不慎接触皮肤或眼睛,立即用大量清水冲洗
试剂配制:洗涤液需现用现配,按比例加入无水乙醇后充分混匀,未使用的稀释液可在2-8℃保存1个月
核酸保存:提取的核酸若长期保存,需置于-70℃环境,避免反复冻融;短期可在4℃保存24小时
器材要求:所有实验器材需为无RNA酶耗材,实验前可经180℃干烤6小时或用RNA酶清除剂处理
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