基本信息
中文名称:Yeast Nucleoside diphosphokinase
货号:P-PR1383
规格:1000U
英文名称:Yeast Nucleoside Diphosphokinase
作用机制:催化核苷二磷酸(NDP)与核苷三磷酸(NTP)之间的磷酸基团转移,维持细胞内NTP池的平衡;参与DNA合成、RNA转录、能量代谢等多种细胞过程,酵母来源的蛋白可真核细胞体系中发挥功能。
适用样本:真核细胞体外代谢研究体系、重组蛋白表达验证、酶促反应体系
产品概述
该酶即核苷二磷酸激酶(NDPK),可催化腺苷三磷酸(ATP)和核苷二磷酸(NDP)之间高能磷酸基团的转移,在体内负责合成除ATP以外的其它核糖核苷酸的生成,反应式为:(d)XDP+(d)YTP↔(d)XTP+(d)YDP。此外,该酶还具有NDP激酶活性和蛋白磷酸转移酶活性,并参与转录调控和信号转导。该蛋白来源于酿酒酵母(S.cerevisiae),通过重组表达获得。
产品组成
Yeast Nucleoside diphosphokinase(20U/μl):50μl
10×NDPK Buffer:1ml,成分包含1M Potassium glutamate、100mM Magnesium acetate
产品特点
双重酶活性:兼具NDP激酶活性和蛋白磷酸转移酶活性
多功能参与:除核苷酸合成外,还可参与转录调控和信号转导
活性定义明确:每单位指37℃条件下,在ATP存在时每分钟转化1.0μmol TDP到TTP所需酶量,比活为1×10^5U/mg,制品浓度约200ng/μl
稳定性良好:-20℃可保存3年
操作步骤
配制反应体系:根据实验需求,取适量Yeast Nucleoside diphosphokinase、10×NDPK Buffer(需稀释至1×)、底物(如(d)XDP和(d)YTP)及ATP,补充无菌水至总体积合适。
反应条件:37℃孵育适当时间,具体时长可根据底物浓度和实验目的调整。
产物检测:通过合适的方法(如高效液相色谱、酶联吸附测定等)检测反应产物生成量,以分析酶活性。
注意事项
活性依赖:反应需在ATP存在的条件下进行,且需Mg²+参与(缓冲液中已提供)
保存条件:需在-20℃低温保存,避免反复冻融,防止酶活性下降
用途限制:仅供科研使用,不得用于临床医疗及其他非科研用途
体系优化:具体反应体系的各组分浓度可根据实验需求进行优化调整
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