基本信息
中文名称:虾碱性磷酸酶(SAP)
货号:P-PR1390
规格:500U、5000U
英文名称:Shrimp Alkaline Phosphatase (SAP)
作用机制:催化核酸分子5'端或3'端的磷酸基团水解,生成羟基末端;可去除DNA/RNA的磷酸基团,防止核酸分子自连接;具有热不稳定性,反应后可通过加热(65℃)快速灭活,避免后续实验干扰。
适用样本:PCR产物去磷酸化、载体去磷酸化、核酸探针标记前处理
产品概述
虾碱性磷酸酶是一种热敏感的碱性磷酸酶,可催化DNA、RNA的5'和3'端磷酸单酯的去磷酸化反应,也能水解核糖和脱氧核糖核苷三磷酸(NTP和dNTP)。它在分子生物学研究中应用广泛,比如阻止载体自连以提高目的片段插入率、制备5'端标记的DNA模板、降解PCR反应中的dNTP用于后续测序和SNP分析等,是小牛肠碱性磷酸酶(CIP)的优质替代物。
产品组成
虾碱性磷酸酶(1U/μL 或 2U/μL)
10×SAP Buffer
产品特点
热敏感特性:65℃温育5分钟即可完全、不可逆失活,后续实验无需纯化去除酶。
底物广泛:可作用于DNA、RNA的粘端、平端,还能水解NTP和dNTP。
纯度可靠:经过严格质控,无核糖核酸酶、脱氧核糖核酸酶污染。
来源明确:通常来自毕赤酵母,克隆有北极虾的碱性磷酸酶基因。
操作步骤
以去磷酸化反应为例:
在EP管中依次加入试剂:DNA片段(1pmol)、10×SAP Buffer(2μL)、虾碱性磷酸酶(1U/μL规格加1μL
,2U/μL规格加0.5μL),用无菌ddH₂O补至20μL。
37℃温育30分钟进行去磷酸化反应。
65℃加热5分钟使酶失活,反应产物可直接用于后续连接等实验。
注意事项
1×SAP Buffer成分:50mM Bis-Tris HCl(pH6.0),1mM MgCl₂,0.1mM ZnCl₂,需在25℃条件下温育使用。
实验过程中请穿实验服并佩戴一次性手套,确保操作安全。
本产品仅作科研用途,禁止用于临床医疗等其他非科研场景。
运输采用冰袋,需-20℃保存,有效期3年。
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关键字: 虾碱性磷酸酶(SAP);Shrimp Alkaline Phos;
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