产品概述:
该蛋白通常带有N端His标签,对应于人源PRD蛋白的1-493氨基酸全长序列,分子量约为54-57 kDa,纯度经SDS-PAGE分析大于95%。PRD(Podocyte Retinoid-Dependent Domain Protein),也称为PepD或脯氨酰肽酶,是一种在肾小球足细胞中特异性表达的蛋白,作为足细胞裂孔隔膜复合物的关键组分,与nephrin、podocin等蛋白相互作用,对维持肾小球滤过屏障的结构与功能完整性至关重要。
产品名称 | Recombinant Human PRD | 货号 | A-01K100482 |
表达区间 | 1-493 | 分子量 | 54.1 kDa |
规格 | 50μg、200ug、1mg | 种属 | Human |
商品介绍:
产品名称:Recombinant Human PRD
种属:Human
宿主:E.Coli
表达区间:1-493
分子量:54.1 kDa
标签:N-terminal His Tag
性状:Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
纯度:Greater than 95% as determined by SDS-PAGE
应用:Western Blot, ELISA
溶解方法:Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存储:-20°C for 12 months as lyophilized; 2-8°C for 1 month under sterile conditions after reconstitution
别称:Aminoacyl L proline hydrolase, Imidodipeptidase, MGC10905, MGC95081, Pep 4, Pep4, pepD, PEPD_HUMAN, Peptidase 4, Peptidase D, Prolidase, Proline dipeptidase, X pro dipeptidase, X-Pro dipeptidase, Xaa-Pro dipeptidase
核心应用:
重组蛋白技术是现代生物技术、医学研究和制药工业的基石,应用极为广泛。
生物制药
这是重组蛋白最核心和价值最高的应用领域。许多过去只能从人或动物体内提取、来源稀少且昂贵的药物,现在都可以通过重组技术大规模生产。例如:细胞因子:如促红素(治疗贫血)
干扰素(抗病毒、抗肿瘤)、白细胞介素等。
激素:如重组人胰岛素(治疗糖尿病)、人生长激素。
凝血因子:用于治疗血友病。
单克隆抗体:已成为肿瘤、自身免疫性疾病等领域最重要的治疗药物之一。
疫苗开发
重组蛋白疫苗是一种重要的疫苗类型。它通过基因工程在体外细胞中表达病毒的关键抗原蛋白(如新冠病毒的RBD蛋白),纯化后制成疫苗。这类疫苗不含活病毒,安全性高,
且抗原成分精确、纯度高。
科研与诊断
重组蛋白是生命科学研究中不可或缺的工具。
细胞培养:作为生长因子、细胞因子等添加剂,用于干细胞诱导、细胞分化等研究。
免疫学研究:作为抗原用于开发ELISA等免疫检测试剂盒,或用于产生抗体。
结构与功能研究:帮助科学家研究蛋白质的结构、功能以及细胞信号通路。
重组表达原理:
基因克隆:从牛基因组中获取CST3基因的编码序列(对应氨基酸31–148),插入含有启动子、筛选标记和His标签序列的质粒载体。
宿主表达:将重组质粒转化至E. coli(如BL21菌株),在IPTG诱导下启动蛋白表达。该系统成本低、表达效率高,适合大规模生产。
蛋白纯化:利用His标签与镍柱亲和层析结合,实现高纯度(>95%)蛋白回收,再经透析或凝胶过滤去除杂质。
冻干保存:加入海藻糖作为保护剂,冻干后可长期稳定储存,复溶后保持天然构象和生物活性。
操作要点:
电泳条件:使用15% SDS-PAGE凝胶,以提高对小分子量蛋白(~13.4 kDa)的分辨率。
转膜参数:采用湿转法,100 V、60–90分钟(4°C),使用PVDF膜(需甲醇预活化)。
抗体选择:
一抗:抗CST3多克隆抗体(如兔源抗体),推荐稀释比为1:1000。
二抗:HRP标记的山羊抗兔IgG,稀释比1:10,000。
显色方式:ECL化学发光法,预期条带位于~13.4 kDa处。
内参建议:由于CST3分子量较小,可选用GAPDH(~37 kDa)或β-actin(~42 kDa)作为内参,避免条带重叠。
公司正在出售的产品:
过量位点蛋白1抗体 | RecQ解旋酶样蛋白5抗体 |
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应用建议?:
实验用途: 适用于Western Blot、ELISA等检测,作为抗原或标准品。
浓度调整: 根据实验需求稀释,避免高浓度导致非特异性结合。
安全提示: 操作时需佩戴手套和护目镜,遵循实验室生物安全规范。
关键字: PRD;Human;E.Coli;
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