重组蛋白(Recombinant Protein):

是指利用重组DNA或RNA技术,在体外人工制造的蛋白质。
这项技术通过将编码特定目标蛋白的基因片段,插入到重组表达载体中,然后导入宿主细胞(如细菌、酵母、哺乳动物细胞等),
利用宿主细胞的“蛋白质工厂”来生产出大量的、具有特定生物学活性的蛋白质。
产品概述:

该蛋白通常带有N端His标签,对应于人源PRD蛋白的1-493氨基酸全长序列,分子量约为54-57 kDa,纯度经SDS-PAGE分析大于95%。PRD(Podocyte Retinoid-Dependent Domain Protein),也称为PepD或脯氨酰肽酶,是一种在肾小球足细胞中特异性表达的蛋白,作为足细胞裂孔隔膜复合物的关键组分,与nephrin、podocin等蛋白相互作用,对维持肾小球滤过屏障的结构与功能完整性至关重要。
产品名称; Recombinant Human PRD
别名; Aminoacyl L proline hydrolase, Imidodipeptidase, MGC10905, MGC95081, Pep 4, Pep4, pepD, PEPD_HUMAN, Peptidase 4, Peptidase D, Prolidase, Proline dipeptidase, X pro dipeptidase, X-Pro dipeptidase, Xaa-Pro dipeptidase
宿主; E.Coli
表达区间; 1-493
分子量; 54.1 kDa
标签; N-terminal His Tag
纯度; Greater than 95% as determined by SDS-PAGE
应用; Western Blot, ELISA
性状; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存储; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
使用说明:

复溶方法: 使用无菌蒸馏水或PBS缓冲液(pH 7.4)溶解冻干粉,轻轻混匀至完全溶解。
应用建议:
实验用途: 适用于Western Blot、ELISA等检测,作为抗原或标准品。
浓度调整: 根据实验需求稀释,避免高浓度导致非特异性结合。
安全提示: 操作时需佩戴手套和护目镜,遵循实验室生物安全规范。
重组表达原理:

基因克隆:从牛基因组中获取CST3基因的编码序列(对应氨基酸31–148),插入含有启动子、筛选标记和His标签序列的质粒载体。
宿主表达:将重组质粒转化至E. coli(如BL21菌株),在IPTG诱导下启动蛋白表达。该系统成本低、表达效率高,适合大规模生产。
蛋白纯化:利用His标签与镍柱亲和层析结合,实现高纯度(>95%)蛋白回收,再经透析或凝胶过滤去除杂质。
冻干保存:加入海藻糖作为保护剂,冻干后可长期稳定储存,复溶后保持天然构象和生物活性。
公司正在出售的产品:

碳水化合物磺基转移酶3 | 冰冻切片组织B(CATHEPSIN B)活性原位荧光染色酶联免疫试剂盒 |
ENTPD8蛋白 | 载玻片细胞CASPASE-1蛋白表达荧光显微镜酶联免疫试剂盒 |
调料谷比色法定量pcr检测试剂盒 | 细胞RyR受体蛋白表达流式细胞仪酶联免疫试剂盒 |
纯化叶绿体DNA萃取试剂盒 | 751型分光光度仪1毫升1厘米光径石英比色皿 |
组织MAPKAP KINASE5激酶活性定量pcr检测试剂盒(A/B/C) | 绿色荧光蛋白TurboGFP抗体 |
海棠(植物) 14-3-3蛋白 | 二氢嘧啶酶相关蛋白3抗体 |
Hanks钙镁平衡盐缓冲溶液(HBSS) | 微粒体甘肽S转移酶(GSH ST)活性比色法定量pcr检测试剂盒 |
聚糖邻氨基吡啶(2-AP)荧光标记试剂盒 | 细胞沉默调节蛋白3(SIRT3)活性荧光定量pcr检测试剂盒 |
组织蛋白酶H迷你链 | 载脂蛋白E2受体抗体 |
肌微管素相关蛋白10 | 8号染色体开放阅读框42抗体 |
PE标记人CD117 (c-kit)单克隆 | 磷酸二酯酶4D抗体 |
AF488标记的转录因子Pax6 | Recombinant Human PRDβ晶体蛋白B1抗体 |
细菌D-葡萄糖含量氧化法定量检测试剂盒 | IQCF5蛋白抗体 |
操作要点:

电泳条件:使用15% SDS-PAGE凝胶,以提高对小分子量蛋白(~13.4 kDa)的分辨率。
转膜参数:采用湿转法,100 V、60–90分钟(4°C),使用PVDF膜(需甲醇预活化)。
抗体选择:
一抗:抗CST3多克隆抗体(如兔源抗体),推荐稀释比为1:1000。
二抗:HRP标记的山羊抗兔IgG,稀释比1:10,000。
显色方式:ECL化学发光法,预期条带位于~13.4 kDa处。
内参建议:由于CST3分子量较小,可选用GAPDH(~37 kDa)或β-actin(~42 kDa)作为内参,避免条带重叠。
存储条件:

冻干状态: 存储于-20°C以下,可稳定保存长达12个月。
复溶后: 在2-8°C下可保存1个月,需保持无菌环境。
注意事项: 避免反复冻融,以防止蛋白降解或活性损失。
关键字: PRD;54.1 kDa; 1-493;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
西格生物专注于实验室和公共卫生领域,利用互联网、数据分析及自动化技术,包括实验室固定资产、仪器设备、生物样本、化学品、试剂、配件耗材、环境、仪器自动化和高通量筛选等一体化综合管理平台。不断为各行业实验室细胞生命学产品、技术服务、免疫学和分子学产品,截止至2024年5月,西格生物已为生命科学、检验检测、化工材料、科研院所、政府机构多行业300余家知名客户提供实验室完整解决方案。本着帮助用户实现“让科研场所更智能、让科研人员更专注、让科学服务更高效“的愿景,西格生物将继续在实验室科研产品领域持续发力,更加重视本土化,建构通用性高、适应性好、模块搭配灵活,能快速响应客户需求的产品。