大鼠6磷酸果糖2激酶；果糖-2,6-二磷酸酶3(PFKFB3)elisa试剂盒
商品属性：
英文名称 | RatPFKFB3 elisa kit | 灵敏度 | 0.15625ng/mL |
检测范围 | 0.3125ng/mL-20ng/mL | 货号 | PR8203 |
核心参数：
检测原理：双抗体夹心 ELISA 法，预包被抗 PFKFB3 抗体，结合生物素化抗体与 HRP，TMB 显色。
种属反应性：大鼠 (Rat)。
样本类型：血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清。
检测时间：约 3 小时。
保存条件：2-8℃避光保存，有效期 6 个月；酶结合物 - 20℃保存。
特异性：特异性识别大鼠 PFKFB3，与 PFKFB1/2/4 亚型无交叉。
板内 / 板间变异系数：板内 CV<10%，板间 CV<15%。
夹心法数据：
| 校准品浓度(ng/mL) | 20.00 | 10.00 | 5.00 | 2.50 | 1.25 | 0.63 | 0.31 | 0.00 |
| OD450/630值 | 2.713 | 1.568 | 0.837 | 0.495 | 0.292 | 0.156 | 0.092 | 0.042 |
| 校正OD值 | 2.672 | 1.526 | 0.796 | 0.453 | 0.250 | 0.115 | 0.050 | 0.000
|
夹心法标曲：
产品定义：
能够检测大鼠样本中6磷酸果糖2激酶/果糖-2,6-二磷酸酶3的含量。PFKFB3是一种双功能酶，可调节细胞内果糖-2,6-二磷酸的水平，进而调控糖酵解途径，在肿瘤细胞的能量代谢中发挥重要作用。该试剂盒为研究肿瘤代谢重编程及相关治疗靶点提供了支持。
操作步骤:
试剂盒平衡：实验前20分钟将试剂盒从冰箱取出，平衡至室温（20-25℃）
板条准备：从铝箔袋中取出所需板条，剩余板条密封放回2-8℃保存
加样
标准品孔：加入不同浓度标准品50μL（浓度通常为10、5、2.5、1.25、0.625、0.3125μg/mL）
样本孔：先加样本稀释液40μL，再加待测样本10μL（最终稀释5倍）
空白孔：不加任何液体
加酶标抗体：除空白孔外，每孔加入HRP标记的检测抗体100μL
温育：封板膜封板后，37℃温育60分钟
洗涤
弃去孔内液体，吸水纸上拍干
每孔加满洗涤液（350μL），静置1分钟后弃去，重复洗板5次
最后一次洗涤后彻底拍干孔内液体
显色：每孔加入显色剂A、B各50μL，轻轻混匀，37℃避光显色15分钟
终止反应：每孔加入终止液50μL，蓝色立即转为黄色
读数：15分钟内用酶标仪在450nm波长处测定各孔OD值
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