土壤酸性木聚糖酶（Soil Acidic Xylanase，S-ACX）测定
试剂盒说明书
微量法100T/48S
正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义：
木聚糖酶(EC 3.2.1.8)主要由微生物产生，能催化水解木聚糖，也被称为戊聚糖酶或半纤维素酶，可分解酿造或饲料工业中的原料细胞壁以及β-葡聚糖，降低酿造中物料的粘度，促进有效物质的释放，以及降低饲料中的非淀粉多糖，促进营养物质的吸收利用，因而广泛的应用于酿造和饲料工业中，ACX一般分离自耐酸的真菌，细菌及部分霉菌。
测定原理：
ACX在酸性环境下能将木聚糖降解成还原性寡糖和单糖，进一步在沸水浴条件下与3,5-二硝基水杨酸发生显色反应，在540nm处有特征吸收峰，反应液颜色的深浅与酶解产生的还原糖量成正比，通过测定反应液在540nm吸光值增加速率，可计算ACX活力。
组成：
产品名称 | SSQ097-100T/48S | Storage |
缓冲液：液体 | 10ml | 4℃ |
试剂一：液体 | 3ml | 4℃避光 |
试剂二：液体 | 10ml | 4℃避光 |
说明书 | 一份 |
自备仪器和用品：
天平、常温离心机、震荡仪、恒温水浴锅、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板。
样品处理：
新鲜土样风干，过30-50目筛。
测定操作表：
分光光度计/酶标仪预热30min，调节波长至540nm。
操作表
| 对照管 | 测定管 |
土样（g） | 0.02 | 0.02 |
缓冲液（μl） | 150 | 100 |
试剂一（μl） |
| 50 |
混匀，50℃震荡反应30min，立即90℃水浴10min，8000g，25℃离心10min，取上清100μl |
试剂二（μl） | 100 | 100 |
混匀，90℃水浴中显色5min，取180μl于微量石英比色皿/96孔板测定540nm处吸光值A，分别记为A对照管、A测定管，△A=A测定管-A对照管。 |
S-ACX计算公式：
用微量石英比色皿测定的计算公式如下
标准曲线：y = 2.5554x - 0.002 ，R2 = 0.9983
酶活定义：50℃，pH4.8条件下，每克土壤每天分解木聚糖产生1μmol 还原糖所需的酶量为一个酶活单位。
S-ACX活力（μmol/d/g土样）= （△A+0.002）÷ 2.5554 ×V反总×103÷ W÷T÷ 150
=18.78 ×（△A+0.002）÷ W
V反总：反应总体积，0.15ml；T：反应时间，1/48d；1000：1mmol/L =103μmol/L；150：木糖分子量。
b.用96孔板测定的计算公式如下
标准曲线：y = 1.2777x - 0.002 ，R2 = 0.9983
酶活定义：50℃，pH4.8条件下，每克土壤每天分解木聚糖产生1μmol 还原糖所需的酶量为一个酶活单位。
S-ACX活力（μmol/d/g土样）=（△A+0.002）÷1.2777×V反总×103÷ W÷T÷ 150
= 37.56 ×（△A+0.002）÷ W
V反总：反应总体积，0.15ml；T：反应时间，1/48d；1000：1mmol/L =103μmol/L；150：木糖分子量。
注意事项：
1. 保证震荡反应30min，使酶与底物充分接触。
2. 注意90℃水浴防止爆开，以免改变反应体系。
关键字： 土壤酸性木聚糖酶;土壤酸性木聚糖酶活性检测;
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