大鼠细胞周期素D3(Cyclin-D3)elisa试剂盒
商品属性:
英文名称
RatCyclin-D3 elisa kit
灵敏度
0.078125ng/mL
检测范围
0.15625ng/mL-10ng/mL
货号
PR9888
核心参数:
检测原理:双抗体夹心 ELISA 检测周期蛋白含量
种属反应性:大鼠高度特异性识别
检测时间:2.5~3h
保存条件:2~8℃避光冷藏
特异性:区分周期素 D1/D2/D3,无交叉
板内变异系数:<8%
夹心法数据:
夹心法标曲:
产品定义:
采用双抗体夹心法:针对Cyclin-D3蛋白的特异性表位设计配对抗体。捕获抗体包被在酶标板上,样本中的Cyclin-D3与之结合后,加入HRP标记的检测抗体。最终通过底物显色反应的OD值,结合标准曲线计算样本中Cyclin-D3的浓度,反映细胞周期G1/S期转换活性。操作流程:
加样
设置标准品孔、样本孔和空白孔:标准品孔加入不同浓度的标准品50μL;样本孔先加样本稀释液40μL,再加待测样本10μL(样本最终稀释5倍,结果需乘以5);空白孔不加任何液体
温育
除空白孔外,每孔加入HRP标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃温育60分钟
洗板
弃去孔内液体,在吸水纸上拍干;每孔加满洗涤液,静置1分钟后弃去,重复洗板5次;最后一次洗板后需将孔内液体彻底拍干
显色
每孔加入底物液A、B各50μL,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟
终止反应
每孔加入终止液50μL,此时蓝色会立即转为黄色
读数
以空白孔调零,15分钟内用酶标仪测定450nm波长下各孔的吸光度(OD值)
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