本试剂盒运用双抗体夹心酶联免疫吸附试验原理,检测大鼠样本中的Cyclin-D3含量。酶标板包被纯化的Cyclin-D3特异性抗体,样本中的靶抗原与固相抗体结合后,加入酶标记二抗形成夹心免疫结构,经洗涤、显色、终止反应后,产物吸光度与Cyclin-D3含量呈正相关,对照标准曲线即可完成定量检测。
基本参数:

产品名称:大鼠细胞周期素D3(Cyclin-D3)ELISA试剂盒
英文名称:Rat Cyclin-D3 ELISA Kit
货号:Y-E1349
规格:48T/96T
灵敏度:最低检测浓度≤1.6pg/mL
检测范围:3pg/mL - 130pg/mL
反应时间:全程125分钟,孵育65分钟,显色40分钟
保存条件:2-8℃冷藏,标准品-20℃分装冻存
有效期:原装有效期10个月,标准品解冻后一次性使用
特异性:特异性识别大鼠Cyclin-D3,与D1、D2亚型区分度高,无交叉干扰
重复性:板内CV≤4%,板间CV≤6%
注意事项:避免反复冻融细胞蛋白样本;实验洗涤需轻柔,防止孔内结合物脱落。
储存与有效期:

未开封整套试剂盒:2~8℃避光冷藏,禁止冷冻;有效期 12 个月。
开封后保存
剩余酶标板条:自封袋密封,内置干燥剂 2~8℃避光;1 个月内用完。
HRP 酶结合物、TMB 底物:避光 2~8℃,避免光照失效。
浓缩洗涤液:2~30℃常温保存,结晶温水溶解不影响效果。
复溶后标准品:分装 - 20℃冻存,避免反复冻融,1 个月内使用。
过期试剂禁止使用。
实验步骤如下:

试剂室温平衡 28min,配制 Cyclin-D3 标准品梯度浓度,样本稀释后上样,空白孔补稀释液,每孔 50μL。
每孔添加酶标记结合液 50μL,封板避光孵育,37℃恒温 73min。
洗板 6 次,每次洗液浸泡 35s,彻底拍干微孔残液。
显色底物 A、B 各 50μL 混匀,避光显色 21min。
加入终止液 50μL 终止显色。
酶标仪 450nm 测定吸光度数据。
绘制标准曲线,计算样本 Cyclin-D3 原液浓度。
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