缺氧诱导因子2α /EPAS1抗体
原理特点
该抗体靶向HIF-2α，主要特异性调控血管生成、红细胞生成、肿瘤低氧适应，与HIF-1α功能差异化。该抗体可精准检测HIF-2α表达水平，特异性解析组织特异性低氧调控机制；同时可抑制其功能，阻断血管新生与肿瘤低氧增殖。
英文名称:HIF 2 alpha Rabbit pAb
中文名称:缺氧诱导因子2α /EPAS1抗体
Not yet tested in other applications.
Optimal working dilutions must be determined by the end user.
英文别名:Basic helix loop helix PAS protein MOP2; Basic-helix-loop-helix-PAS protein MOP2; bHLHe73; Class E basic helix-loop-helix protein 73; ECYT4; Endothelial PAS domain containing protein 1; Endothelial pas domain protein 1; Endothelial PAS domain-containing protein 1; EPAS 1; EPAS-1; EPAS1; EPAS1_HUMAN; HIF 1 alpha like factor; HIF-1-alpha-like factor; HIF-2-alpha; HIF2-alpha; HIF2A; HLF; Hypoxia inducible factor 2 alpha; Hypoxia inducible factor 2 alpha subunit; Hypoxia-inducible factor 2-alpha; Member of PAS protein 2; Member of pas superfamily 2; MOP 2; MOP2; PAS domain-containing protein 2; PASD2.
交叉反应:Mouse,Rat
抗体来源:Rabbit
免疫原:KLH conjugated synthetic peptide derived from mouse HIF 2 Alpha
亚型:IgG
性状:Liquid
纯化方法:affinity purified by Protein A
克隆类型:Polyclonal
克隆号：None
理论分子量：96 kDa
浓度：1mg/ml
储存液：0.01M TBS (pH7.4) with 1% BSA, 0.02% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存条件：Shipped at 4℃. Store at -20℃ for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
注意事项：This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
靶点背景
靶点背景：HIF-2α 与 HIF-1α 结构同源但组织特异性不同，主要在内皮、肾脏、肺、肿瘤干细胞表达，主导血管发育、红细胞生成、肾癌驱动。
作用原理：靶向 EPAS1 独有差异肽段制备抗体，严格区分 HIF 各 α 亚型，无交叉反应。
产品特点：可特异性标记肾透明细胞癌、肺内皮细胞；用于血管发育、肾癌靶向机制、慢性缺氧造血调控研究。
核心实验操作方法
1. Western Blot（WB）
抗体孵育
一抗孵育：用5%脱脂牛奶或BSA稀释抗体至推荐浓度（如1:1000），4℃摇床缓慢孵育过夜；或室温孵育1-2小时，孵育时保证膜完全浸没在抗体溶液中。
洗涤：用TBST缓冲液洗涤3次，每次5分钟，洗去未结合的一抗；加入HRP标记二抗（1:5000-1:10000稀释），室温孵育1小时。
显影：再次洗涤后，加入ECL发光液孵育1-2分钟，用化学发光成像仪采集图像，根据信号强度调整曝光时间。
2. 免疫组化（IHC）
抗体孵育
一抗孵育：滴加稀释后的一抗（如1:200）于组织切片上，置于湿盒中4℃孵育过夜；次日室温复温30分钟，PBS冲洗3次，每次5分钟。
二抗结合：加入生物素标记二抗（1:200）室温孵育30分钟，PBS冲洗后加入ABC复合物（1:100）室温孵育30分钟。
显色封片：DAB显色剂显色3-10分钟（显微镜下观察控制时间），苏木素复染1分钟，梯度乙醇脱水后中性树胶封片。
3. 免疫荧光（IF）
抗体孵育
一抗孵育：用5% BSA稀释抗体至工作浓度（如1:100），滴加在细胞爬片上，4℃避光孵育过夜；室温复温后PBS冲洗3次，每次5分钟。
二抗结合：加入荧光标记二抗（如FITC标记抗兔IgG，1:200），室温避光孵育30-60分钟；PBS冲洗后用抗淬灭封片液封片。
观察：荧光显微镜或共聚焦显微镜下观察，激发波长根据二抗标记物选择（如FITC为488nm）。
4. ELISA实验
包被与孵育
包被：用包被缓冲液（pH9.6碳酸盐缓冲液）稀释抗原至1-10μg/ml，每孔加入100μl，4℃过夜孵育。
封闭与一抗孵育：弃去包被液，PBST洗涤3次，加入5% BSA封闭液200μl/孔，37℃孵育1小时；加入稀释后的一抗100μl/孔，37℃孵育1-2小时或4℃过夜。
检测：洗涤后加入酶标二抗（1:5000），37℃孵育1小时；TMB底物溶液显色10-30分钟，2M硫酸终止反应后，酶标仪450nm波长读取OD值。
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