.硫酸软骨素A(24967-93-9)的制备: (1)提取、酶解、沉淀、干燥: 称取猪喉、鼻软骨投入5倍量的20g/L(2%)氢氧化钠溶液中浸泡,间歇搅拌,待浸出液达到5.5°Be时,过滤,滤渣再提取1次,合并滤液。在50℃用粗制胰酶水解,除去蛋白质等杂质,过滤至澄明,调pH6,加乙醇使醇含量达75%,静置过夜。离心分离,沉淀用无水乙醇洗涤,于60℃干燥,得硫酸软骨素粗品。
猪喉、鼻软骨[20g/LNaOH]→提取液[胰酶]→[50℃]酶解液[75%乙醇]→[pH6]粗制品
(2)分级分离: 取粗品1kg加入蒸馏水20L,乙酸1L和氯化钙500g(以无水计)的混合液中,搅拌至全溶,再加乙醇的体积分数达50%,有沉淀析出,静置过夜。离心,收集钙盐沉淀物。再溶于蒸馏水40L,乙酸1.5L和氯化钙100g(以无水计)的混合液中,搅拌溶解,加入乙醇的体积分数为29%,沉淀析出,离心分离(沉淀回收CSA-Ca)。上清乙醇液中,继续加入适量乙醇,搅拌使其产生白色永久性混浊,静置过夜。次日,再加适量乙醇使其浓度达39%,放置沉淀结晶7d。离心,沉淀用无水乙醇洗涤,60℃干燥,得CSA-Ca。上清乙醇液回收CSA-Ca。
粗制品[水,HAc,CaCl2,乙醇]→CSA-Ca
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