人色氨酸-2,3-双加氧酶(TDO)重组蛋白 新品

人色氨酸-2,3-双加氧酶(TDO)重组蛋白用于色氨酸分解代谢酶活检测、肿瘤免疫逃逸、中枢神经免疫及抑郁相关体外通路验证实验。

型号：YS-DB1481

产品名称：人色氨酸-2,3-双加氧酶(TDO)重组蛋白

物种：Homo sapiens (Human，人)

英文名称：Recombinant Tryptophan-2,3-dioxygenase (TDO)

TDO2; TPH2; TO; TRPO; Tryptophanase; Tryptophan oxygenase

酶与激酶

物种：Homo sapiens (Human，人)

来源：原核表达

宿主E.coli

内毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法测定)

亚细胞定位：：细胞质

预测分子量：51.6kDa

实际分子量：50kDa(差异分析请参阅说明书)

片段与标签：Met1~Asp406 with N-terminal His Tag

缓冲液成份：PBS, pH7.4, containing 0.01% SKL, 5% Trehalose.

性状：冻干粉

纯度：> 90%

等电点：6.5

应用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

规格：10μg、50μg、200μg、1mg、5mg
检测原理：

色氨酸氧化开环催化原理：TDO 以氧气为辅底物，催化 L - 色氨酸吲哚环氧化裂解，生成 N - 甲酰犬尿氨酸。

紫外分光光度法产物追踪：底物色氨酸与产物具有差异化特征吸收峰，吸光度变化计算氧化速率、酶活水平。

免疫印迹蛋白定性质控：TDO 特异性抗体验证重组蛋白表达正确、分子量匹配理论值。

血红素辅因子依赖性验证：TDO 依赖血红素激活，缺失辅因子活性大幅下降，佐证催化特异性。
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常见实验场景操作指南：

细胞培养实验

浓度优化：先设置预实验梯度（如0.1ng/mL、1ng/mL、10ng/mL、100ng/mL），检测细胞增殖、分化或信号通路激活情况，确定最优工作浓度。

添加时机：细胞接种后24-48小时，待细胞贴壁且状态稳定时添加重组蛋白。

更换培养基：若蛋白半衰期较短，需每隔24-48小时更换含新鲜蛋白的培养基。

免疫检测实验

阳性对照设置：在ELISA或WB实验中，用已知浓度的重组蛋白制备标准曲线，确保定量准确性。

封闭处理：若蛋白用于包被ELISA板，包被后需用5%脱脂牛奶或BSA封闭，降低非特异性结合。

抗体配对：选择针对不同表位的捕获抗体和检测抗体，避免与重组蛋白的标签产生交叉反应。

蛋白相互作用实验

标签选择：若使用Pull-down实验，优先选择GST或His标签的重组蛋白，便于亲和层析分离。

反应条件：在生理缓冲液（如PBS）中进行，温度控制在4℃，避免蛋白变性。

阴性对照：设置不含目标蛋白的对照组，排除标签非特异性结合的干扰。