本试剂盒采用竞争法酶联免疫吸附检测原理,微孔板预先包被大鼠E2固相抗原,加入待测样本和酶标E2特异性抗体后,样本中的游离E2抗原与固相E2抗原竞争结合有限的酶标抗体结合位点,样本中E2浓度越高,固相结合的酶活性越低,底物显色越浅,终止反应后检测吸光度,根据标准曲线负相关关系定量测定大鼠样本中E2的含量。
基本参数:

产品名称:大鼠雌二醇(E2)ELISA试剂盒
英文名称:E2 ELISA Kit
货号:Y-E1611
规格:48T/96T
灵敏度:最低检出限5pg/mL,可精准检测大鼠微量性激素水平,适配基础内分泌检测。
检测范围:10pg/mL - 1000pg/mL,覆盖大鼠生理、病理状态下雌二醇表达区间。
反应时间:总时长90分钟,样本孵育30min、酶结合物孵育30min、显色25min、终止读数5min。
保存条件:2 - 8℃避光密封保存,性激素检测试剂需单独存放,避免与腐蚀性试剂混放。
有效期:原装未开封有效期6个月,开封后2周内使用最佳。
显色系统:高灵敏性激素专用TMB显色体系,低浓度激素显色辨识度高。
检测波长:450nm标准检测波长,检测精准度高。
标准曲线绘制:六梯度标准品稀释,四参数拟合曲线,R²≥0.995。
特异性:特异性识别大鼠雌二醇,与雌三醇、孕酮等性激素无明显交叉反应。
重复性:板内CV≤3.5%,板间CV≤5.5%,内分泌检测数据稳定。
注意事项:血清样本无溶血、无脂血,脂质会干扰性激素结合反应;实验全程避免强光照射,防止激素降解;标准品梯度稀释需精准操作,避免浓度误差。
关键注意事项:

本试剂盒仅科研体外检测,严禁临床诊断使用。
全程避免试剂、板条强光直射,TMB 见光易失效。
移液器吸头一次性使用,杜绝交叉污染;所有操作无酶、无热源。
孵育温度严格控制 37℃,温度偏低会降低 OD 值、灵敏度下降。
洗板必须充分,残液会造成非特异性结合,背景偏高。
终止后需快速读数,放置过久吸光度会漂移,结果失真。
终止液含稀硫酸,避免接触皮肤、眼睛,若不慎接触大量清水冲洗。
实验废弃物按生物安全废弃物规范处理。
不同批次试剂盒组分不可混用。
试剂盒运输全程 2~8℃冷链,严禁高温暴晒。
实验步骤如下:

E2 标准品梯度稀释,试剂盒室温平衡 26min,标记酶标板标准、样本、空白孔;
标准孔加 50μL 梯度标准品,样本孔加入大鼠血清 50μL,空白孔补稀释液;
加入 100μL 酶标记抗 E2 抗体,覆膜封闭板面;
37℃恒温孵育 60min,一步共孵育抗原抗体结合;
洗涤缓冲液浸泡 30s,吸干残留液体,洗板 5 次;
避光加入显色底物 A、B 各 50μL,37℃避光显色 13min;
终止液终止显色,450nm 读数,计算 E2 含量。
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