本试剂盒基于竞争ELISA检测原理,微孔板固定大鼠E3固相抗原,反应体系中待测样本中的游离E3抗原与固相抗原竞争性结合酶标记特异性抗体,形成竞争抑制效应,样本中E3含量越高,固相免疫复合物的显色信号越弱,终止反应后检测吸光度数值,对照标准曲线即可精准定量大鼠样本中E3的浓度。
基本参数:

产品名称:大鼠雌三醇(E3)ELISA试剂盒
英文名称:E3 ELISA Kit
货号:Y-E1616
规格:48T/96T
灵敏度:最低检出限8pg/mL,适配大鼠妊娠期、生理周期微量雌三醇检测。
检测范围:20pg/mL - 1200pg/mL,覆盖大鼠不同生理阶段雌三醇表达浓度。
反应时间:总时长85分钟,样本孵育30min、酶孵育25min、显色25min、终止读数5min。
保存条件:2 - 8℃避光保存,所有试剂避免室温久置,防止激素活性下降。
有效期:原装试剂盒有效期6个月,开封后1个月内用完。
显色系统:激素专用高灵敏TMB显色系统,显色均匀稳定。
检测波长:450nm单一精准检测波长。
标准曲线绘制:六梯度浓度标准品,四参数拟合,R²≥0.995。
特异性:特异性识别大鼠雌三醇,与雌二醇、睾酮等激素无交叉反应。
重复性:板内CV≤3.2%,板间CV≤5.2%,数据偏差极小。
注意事项:孕期大鼠样本需轻柔采集,避免样本污染;所有移液操作精准统一,保证加样一致性;洗板避免液体残留,降低背景值。
试剂盒组成:

预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原,结合目标物
标准品 6支/套 制备标准曲线,定量检测依据
生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物,提供酶结合位点
辣根过氧化物酶(HRP)标记亲和素 1瓶 与生物素结合,催化底物显色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物,产生颜色变化
终止液 1瓶 终止酶促反应,稳定显色结果
浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板,去除未结合物质
封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发
实验步骤如下:

试剂室温平衡 29min,梯度稀释 E3 标准品,标记酶标板各类微孔;
标准孔、待测孔分别加入 50μL 梯度标准品、大鼠血浆样本,空白孔加稀释液;
全部微孔即刻加入 100μL 酶标抗 E3 抗体,封板膜密封;
37℃恒温孵育 63min,一步孵育形成免疫复合物;
洗涤液浸泡微孔 40s,彻底拍干,循环洗板 5 次;
避光加入显色底物 A、B 各 50μL,37℃避光显色 17min;
终止液终止反应,450nm 测吸光度,计算 E3 表达水平。
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