双抗体夹心免疫酶联原理,板底包被抗 E-Cad 捕获抗体,样本上皮黏附蛋白 E-Cad 结合固相抗体,酶标二抗识别抗原第二表位,洗涤显色后定量上皮屏障相关 E-Cad 蛋白。
产品参数:
产品名称 | 大鼠E钙黏蛋白/上皮钙黏蛋白(E-Cad)ELISA试剂盒 | 货号 | Y-E1571 |
英文名称 | E-Cad ELISA Kit | 规格 | 48T/96T |
灵敏度:最低检测限0.08ng/mL,可精准检测大鼠上皮组织微量E-Cad表达
检测范围:0.15ng/mL - 100ng/mL,覆盖肿瘤、组织损伤模型大鼠样本浓度
反应时间:总反应时长130分钟,样本孵育70分钟,酶孵育30分钟,显色15分钟,终止5分钟
保存条件:2 - 8℃避光冷藏保存,微孔板密封防潮,试剂避免室温久置
有效期:原装未拆封有效期6个月,规范储存活性稳定
显色系统:高灵敏TMB显色体系,低表达样本显色清晰
检测波长:450nm检测,570nm辅助校正
标准曲线绘制:7点梯度标准浓度,四参数拟合,R²≥0.996
特异性:特异性结合大鼠E-钙黏蛋白,与N-钙黏蛋白无交叉反应
重复性:板内CV≤5%,板间CV≤7%,重复性优异
注意事项:上皮组织样本需充分裂解,去除杂质;避免样本反复冻融破坏蛋白结构;洗涤彻底,降低非特异性结合背景
关键注意事项:
实验前需仔细阅读对应试剂盒的说明书,不同试剂盒的孵育时间、加样量可能存在差异
所有试剂需按要求储存,未用完的试剂需密封后放回规定温度(通常2-8℃或-20℃)
避免试剂污染,不同组分的移液器枪头需分开使用
洗板时需确保每孔都被洗涤液覆盖,防止出现假阳性结果
显色过程需避光,避免阳光直射影响结果
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实验操作流程:
试剂平衡:试剂室温放置 30min,洗涤液 1:20 稀释,上皮组织裂解液回暖混匀。
标准品稀释:E-Cad 标准品溶解梯度稀释 6 梯度,空白孔仅加稀释液。
加样孵育:每孔 50μL 标准品 / 样本,酶结合物 50μL,37℃避光孵育 63min。
洗板操作:洗涤液浸泡 34s,彻底拍干,洗板 6 次。
底物显色:底物 A、B 各 50μL,避光孵育 17min。
终止读数:终止液混匀,10min 内 450nm 读数。
数据计算:标准曲线定量 E-Cad,检测上皮细胞间黏附能力。
关键字: 大鼠E钙黏蛋白/上皮钙黏蛋白;E-Cad;ELISA试剂盒;
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