本试剂盒采用双抗体夹心ELISA原理，酶标板微孔包被有抗人E-Cad特异性单克隆抗体，加入标准品、组织匀浆、细胞上清等待测样本，样本中的E钙粘着蛋白与固相抗体特异性结合，洗涤后加入HRP标记的E-Cad检测抗体，形成稳定的夹心免疫复合物，经TMB底物显色、终止反应后检测OD值，通过标准曲线计算样本中E-Cad的表达浓度，反映上皮细胞黏附状态。
基本参数：
产品名称：人E钙粘着蛋白/上皮性钙黏附蛋白(E-Cad)ELISA试剂盒
英文名称：E-Cad Elisa Kit
货号：Y-E183
规格：48T/96T
灵敏度：最低检测值0.1ng/mL，可精准检测组织、细胞上清中低丰度E-Cad蛋白
检测范围：0.2ng/mL - 30ng/mL，覆盖肿瘤侵袭、组织损伤模型样本区间
反应时间：标准实验时长90分钟
保存条件：2-8℃冷藏保存，禁止冷冻，包被板开封后密封防潮
有效期：原装密封有效期12个月
特异性：专一结合人E-Cad蛋白，与N-Cad、P-Cad等钙黏蛋白无交叉反应
重复性：板内、板间变异系数均＜7%，实验数据稳定
注意事项：细胞样本需充分裂解，离心去除杂质；避免样本氧化，影响蛋白检测结果
储存与有效期：
未开封整套试剂盒：2～8℃避光冷藏，禁止冷冻；有效期 12 个月。
开封后保存
剩余酶标板条：自封袋密封，内置干燥剂 2～8℃避光；1 个月内用完。
HRP 酶结合物、TMB 底物：避光 2～8℃，避免光照失效。
浓缩洗涤液：2～30℃常温保存，结晶温水溶解不影响效果。
复溶后标准品：分装 - 20℃冻存，避免反复冻融，1 个月内使用。
过期试剂禁止使用。
实验步骤如下：
试剂盒试剂室温放置 25min，稀释洗涤液；E-Cad 标准品溶解后梯度稀释，细胞上清 / 组织匀浆样本离心备用。
酶标板分孔加样，标准品与待测样本每孔 100μL，空白孔补稀释液。
一步加入酶偶联检测抗体 100μL，轻微振荡混匀，封板膜封口。
37℃孵育 55min。
弃废液，洗涤液洗板 4 次，每次静置 35s 后拍干。
底物显色液每孔 100μL，避光显色 14min。
终止后 450nm 读取吸光度，标准曲线换算 E-Cad 蛋白浓度。
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