竞争 ELISA 检测原理,微孔板包被 β-EP 标准多肽抗原,样本内源 β 内啡肽与固相抗原竞争结合 HRP 标记抗 β-EP 抗体,洗涤后底物显色,吸光度与样本 β-EP 浓度呈负相关,梯度标准品拟合曲线实现定量检测。
产品参数:
产品名称 | 大鼠β内啡肽(β-EP)ELISA试剂盒 | 货号 | Y-E1381 |
英文名称 | β-EP ELISA Kit | 规格 | 48T/96T |
灵敏度:最低检测灵敏度≤0.9pg/mL
检测范围:2pg/mL - 750pg/mL
反应时间:总反应时长120分钟(60分钟温育+30分钟显色)
保存条件:2-8℃避光冷藏,神经多肽试剂密封低温保存
有效期:原装未拆封12个月
显色系统:稳定型TMB显色体系
检测波长:450nm
标准曲线绘制:多肽标准梯度OD值四参数拟合曲线,精准定量
特异性:特异性结合大鼠β内啡肽,与脑啡肽、强啡肽无交叉反应
重复性:板内CV≤7%,板间CV≤9%
注意事项:样本采集后快速低温离心,避免多肽降解;避免剧烈震荡,防止样本变性。
关键注意事项:
本试剂盒仅科研体外检测,严禁临床诊断使用。
全程避免试剂、板条强光直射,TMB 见光易失效。
移液器吸头一次性使用,杜绝交叉污染;所有操作无酶、无热源。
孵育温度严格控制 37℃,温度偏低会降低 OD 值、灵敏度下降。
洗板必须充分,残液会造成非特异性结合,背景偏高。
终止后需快速读数,放置过久吸光度会漂移,结果失真。
终止液含稀硫酸,避免接触皮肤、眼睛,若不慎接触大量清水冲洗。
实验废弃物按生物安全废弃物规范处理。
不同批次试剂盒组分不可混用。
试剂盒运输全程 2~8℃冷链,严禁高温暴晒。
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实验操作流程:
试剂平衡:试剂盒室温复温 24min,20× 洗涤液蒸馏水稀释,酶标板按需拆分。
标准品稀释:β-EP 冻干标准品溶解配置 6 组梯度,双复孔检测。
样本上样:标准孔 50μL 梯度标准液,脑脊液、脑组织匀浆样本 50μL 上样。
酶结合物孵育:每孔 50μL HRP 标记 β-EP 抗体,封膜 37℃避光孵育 60min。
洗板:洗涤液浸泡 31s,拍干,循环洗板 5 次。
显色:TMB 底物各 50μL,避光 37℃孵育 14min。
终止检测:终止液混匀,8min 内 450nm 读数,换算 β 内啡肽浓度。
关键字: 大鼠β内啡肽;β-EP;ELISA试剂盒;
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