本试剂盒运用双抗体夹心酶联免疫吸附检测原理,微孔板固相包被人α-内吗啡肽(α-EP)特异性抗体,孵育过程中样本内的α-EP抗原与固相抗体特异性免疫结合,洗板去除非特异性结合物质后,加入HRP标记的α-EP检测抗体形成稳定免疫复合物,洗涤后底物显色、终止反应,通过检测吸光度值,依据正相关关系定量测定样本中α-EP的含量。
产品参数:
产品名称 | 人α-内吗啡肽(α-EP)ELISA试剂盒 | 货号 | Y-E191 |
英文名称 | α-EP Elisa Kit | 规格 | 48T/96T |
1.灵敏度:最小检测≤1pg/mL
2.检测范围:2pg/mL - 64pg/mL
3.反应时间:竞争法孵育 120min,二抗 65min,显色 26min
4.显色系统:双组份 TMB 显色体系
5.检测波长:450nm
6.特异性:针对 α-EP 多肽序列,与 β- 内啡肽无明显交叉反应
7.重复性:板内 CV<5%,板间 CV<7.5%
8.注意事项:多肽类标准品极易降解,稀释后必须当日用完不可留存
关键注意事项:
实验前需仔细阅读对应试剂盒的说明书,不同试剂盒的孵育时间、加样量可能存在差异
所有试剂需按要求储存,未用完的试剂需密封后放回规定温度(通常2-8℃或-20℃)
避免试剂污染,不同组分的移液器枪头需分开使用
洗板时需确保每孔都被洗涤液覆盖,防止出现假阳性结果
显色过程需避光,避免阳光直射影响结果
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实验操作流程:
1. 试剂盒全部试剂室温回温 35min,按比例稀释洗涤液,标准品用稀释液梯度稀释,血浆样本避光预处理。
2. 酶标板标记孔位,标准品孔加入梯度标准品 50μL,样本孔加入避光处理后待测液 50μL,空白孔不加任何试剂。
3. 实验组每孔加入酶标记二抗 100μL,封板密封,轻晃酶标板混匀反应液体。
4. 37℃密闭避光孵育 75min,全程避光防止多肽降解。
5. 弃净孔内反应液,洗涤液浸泡 35s 后拍干,重复洗板 6 次,最大限度去除非特异性吸附。
6. 避光操作加入显色底物 A、B 各 50μL,混匀后 37℃避光显色 12min。
7. 终止液终止显色,15min 内完成酶标仪检测,对照标准曲线得到 α-EP 含量。
关键字: 人α-内吗啡肽;α-EP;ELISA试剂盒;
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