竞争型 ELISA 原理,微孔板包被 βOHB 偶联抗原,样本游离 β 羟丁酸竞争结合体系内酶标记抗 βOHB 特异性抗体,洗涤后底物显色,显色强度与样本 βOHB 浓度负相关,参照标准曲线反向定量样本酮体含量。
产品参数:
产品名称 | 大鼠β羟丁酸(βOHB)ELISA试剂盒 | 货号 | Y-E1122 |
英文名称 | β-OHB ELISA Kit | 规格 | 48T/96T |
灵敏度:最低检测灵敏度≤0.05mmol/L
检测范围:0.1mmol/L - 5mmol/L
反应时间:总反应时长90分钟(30分钟酶促反应+30分钟显色)
保存条件:2-8℃避光冷藏,生化检测试剂常温可短期存放
有效期:原装未拆封12个月
显色系统:酶促底物显色体系
检测波长:450nm
标准曲线绘制:β羟丁酸标准浓度梯度拟合曲线,计算样本含量
特异性:特异性检测大鼠βOHB,与乳酸、丙酮酸无交叉干扰
重复性:板内CV≤8%,板间CV≤10%
注意事项:血清样本无溶血、无脂血;反应温度、时间严格把控,保证生化反应稳定。
试剂盒组成:
预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原,结合目标物
标准品 6支/套 制备标准曲线,定量检测依据
生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物,提供酶结合位点
辣根过氧化物酶(HRP)标记亲和素 1瓶 与生物素结合,催化底物显色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物,产生颜色变化
终止液 1瓶 终止酶促反应,稳定显色结果
浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板,去除未结合物质
封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发
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实验操作流程:
试剂平衡:试剂盒室温平衡 21min,20 倍洗涤液稀释混匀,酶标板拆分使用。
标准品稀释:βOHB 标准品溶解配置 6 个梯度,现配现用不可久放。
样本上样:标准孔 50μL 标准液,血清、肝脏匀浆样本 50μL 上样。
孵育反应:每孔 50μL HRP 标记 βOHB 特异性抗体,封膜 37℃避光孵育 55min。
洗板:洗涤液浸泡 28s,拍干,洗板 5 次。
显色:TMB 底物各 50μL,避光 37℃反应 13min。
终止检测:终止液混匀,6min 内 450nm 读数,计算 β 羟丁酸含量。
关键字: 大鼠β羟丁酸;βOHB;ELISA试剂盒;
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