大鼠β血小板球蛋白/β血栓环蛋白(β-TG)ELISA试剂盒

双抗体夹心 ELISA 体系，微孔板固定抗大鼠 β-TG 捕获抗体，血浆样本中释放的 β 血小板球蛋白结合固相抗体，洗除游离蛋白后加入 HRP 标记抗 β-TG 检测抗体形成夹心复合物，显色测吸光度，标准曲线定量 β-TG 含量。
产品参数：

‌灵敏度：最低检测灵敏度≤0.5ng/mL

检测范围：1ng/mL - 40ng/mL

反应时间：样本孵育60分钟，二抗孵育60分钟，显色15分钟，总反应135分钟

保存条件：所有试剂2-8℃避光冷藏保存，浓缩洗涤液低温避光存放，防止结晶

有效期：原装未拆封试剂盒有效期6个月

显色系统：TMB底物显色系统，酸性终止液终止显色反应

检测波长：450nm单波长检测

标准曲线绘制：梯度稀释标准品，检测对应OD值，采用四参数Logistic拟合绘制标准曲线，换算样本含量

特异性：特异性结合大鼠β-TG，与大鼠血小板相关同源蛋白无交叉反应，异种物种样本无特异性结合

重复性：板内CV≤7%，板间CV≤9%，检测数据稳定性高

注意事项：1. 血浆样本需严格抗凝处理，避免血小板激活影响检测；2. 洗涤步骤严格按照次数及时长操作，杜绝非特异性吸附；3. 终止液具有腐蚀性，操作时做好防护；4. 试剂盒不同组分不可混用其他批次试剂。
实验前准备工作：

1. 试剂平衡与稀释

试剂盒所有组分（酶标板、标准品、酶结合物、底物、洗涤浓缩液、样本稀释液、终止液）从 2~8℃取出，室温（20~25℃）放置平衡 30min，严禁直接低温操作。

浓缩洗涤液配制：按标签标注比例用去离子纯水稀释（常见 20× 浓缩液：1 份浓缩液 + 19 份纯水），混匀备用，现配现用。

标准品复溶 / 梯度稀释：

冻干标准品加入配套标准品稀释液充分溶解，室温静置 10min，轻柔吹打混匀；

按说明书梯度倍比稀释出 5~7 个浓度梯度标准品，单独标记，剩余原液分装 - 20℃避光保存，避免反复冻融。

待测样本预处理：血清 / 血浆、组织匀浆、细胞上清用样本稀释液适当稀释，浑浊样本 12000r/min 离心 10min 取上清；溶血、脂血严重样本弃用。

2. 耗材与设备准备

设备：恒温 37℃孵育箱、酶标仪（450nm 主波长，630nm 参比）、多通道移液枪、吸水滤纸、洗板机（或手动洗板槽）、封板膜、离心管。

耗材无核酸酶、无热源、无蛋白污染，移液枪提前校准。

取出本次实验所需酶标板条，剩余未使用板条装入铝箔密封袋，加干燥剂 2~8℃避光保存。

3. 孔位规划标记

酶标板做好分区标记：空白孔、零标准孔、梯度标准品孔、待测样本孔、复孔（所有样本、标准品建议设置双复孔降低误差）。

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实验操作流程：

试剂平衡：全部试剂室温放置 27min，浓缩洗涤液 1:20 稀释混匀备用。

标准品配制：β-TG 冻干标准品充分溶解，梯度稀释 7 个浓度梯度。

加样：标准孔 50μL 标准品，血浆样本 50μL 加入检测孔，空白孔稀释液。

酶抗体孵育：每孔 50μL HRP-β-TG 抗体，密封 37℃避光孵育 68min。

洗板：洗涤液浸泡 37s，拍干，洗板 6 次。

显色：底物 A、B 各 50μL，避光 37℃显色 19min。

终止读数：终止液摇匀，10min 内 450nm 检测，计算 β-TG 含量。