本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法检测样本中人HB-β含量,以包被于微孔板的抗人HB-β特异性抗体为固相捕获载体,加入标准品及待测样本后,样本中的HB-β抗原与固相抗体特异性结合,洗涤去除未结合组分,加入酶标记抗HB-β抗体进行特异性结合,形成免疫夹心复合物,洗涤去除游离酶标抗体后,底物在结合酶的作用下发生显色反应,显色深浅与样本中HB-β含量成正比,通过检测吸光度并对照标准曲线,可精准定量样本中HB-β的含量。
产品参数:
产品名称 | 人血红蛋白β亚基(HB-β)ELISA试剂盒 | 货号 | Y-E2824 |
英文名称 | HB-β ELISA Kit | 规格 | 48T/96T |
灵敏度:最小检出 0.06ng/mL
检测范围:0.2~12.8ng/mL
反应时间:样本孵育 45min,酶标二抗 35min,显色 18min,合计 98min
保存条件:未开封 2~8℃,剩余板条带干燥剂密封室温暂存不超 3 天
显色系统:可溶性 TMB 显色底物,避光显色
检测波长:450nm 单波长测定吸光度
标准曲线绘制:六组标准品浓度,四参数拟合曲线用于样本浓度换算
注意事项:试剂滴加顺序不可颠倒,终止液具有腐蚀性避免接触皮肤
关键注意事项:
实验前需仔细阅读对应试剂盒的说明书,不同试剂盒的孵育时间、加样量可能存在差异
所有试剂需按要求储存,未用完的试剂需密封后放回规定温度(通常2-8℃或-20℃)
避免试剂污染,不同组分的移液器枪头需分开使用
洗板时需确保每孔都被洗涤液覆盖,防止出现假阳性结果
显色过程需避光,避免阳光直射影响结果
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实验操作流程:
样本预处理:抗凝血液样本离心分离红细胞组分,裂解处理后用配套稀释液稀释待测样本,颠倒混匀 8 次,室温静置 8min;所有试剂提前室温放置 28min。
同步加样孵育:设定空白对照孔、梯度标准品孔、待测样品孔,每孔加入样品与酶结合液,封板膜密封,37℃恒温孵育 65min。
微孔洗涤步骤:倒掉孔内液体,每孔注满洗涤液,浸泡 30s 后甩干,循环洗板 5 遍,吸水纸倒扣拍干微孔残留洗液。
底物显色反应:依次加入显色液 A、B,微量震荡混匀,避光条件下 37℃显色 14min。
终止液终止反应:精准计时后添加终止液,终止酶促显色反应,轻晃酶标板混匀孔内体系。
仪器检测读数:酶标仪选用 450nm 波长检测各孔 OD 值,逐一记录对应孔位数据。
浓度换算统计:绘制标准曲线,代入样本吸光度数值算出稀释后浓度,换算稀释比例得到 HB-β 实际浓度,填写实验报告单。
关键字: 人血红蛋白β亚基;HB-β;ELISA试剂盒;
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