本试剂盒基于双抗体夹心ELISA检测技术,酶标板微孔包被纯化的大鼠sIgA特异性捕获抗体,加入标准品和待测大鼠黏膜分泌物、血清样本,样本中的sIgA抗原与固相抗体特异性结合,洗板去除游离杂质,加入HRP标记的sIgA检测抗体,形成特异性免疫夹心复合物,经洗涤后显色反应,终止后检测吸光度,对照标准曲线定量检测sIgA含量。
基本参数:

产品名称:大鼠分泌型免疫球蛋白A(sIgA)ELISA试剂盒
英文名称:sIgA ELISA Kit
货号:Y-E1316
规格:48T/96T
灵敏度:最低检测灵敏度0.2μg/mL,可精准检测大鼠黏膜组织、血清、灌洗液中sIgA含量
检测范围:0.5μg/mL~30μg/mL,覆盖大鼠黏膜免疫模型sIgA正常及异常表达区间
反应时间:总实验时长130分钟,一抗孵育100分钟,显色反应30分钟
保存条件:全套试剂2~8℃避光冷藏,酶标板密封防潮保存,防止孔位失效
有效期:未开封有效期6个月,开封后试剂20天内用完,避免抗体失活
显色系统:增强型TMB显色体系,显色饱和度高,低浓度样本显色清晰
检测波长:450nm检测波长,570nm背景校正波长
标准曲线绘制:7个梯度标准浓度,四参数曲线拟合,R²≥0.993,检测线性稳定
特异性:特异性结合大鼠sIgA,与IgG、IgM、IgE等其他免疫球蛋白无交叉反应
重复性:板内CV≤4.8%,板间CV≤6.8%,批次差异小
注意事项:黏膜样本采集后需低温保存,避免蛋白降解;酶标板开封后需一次性用完剩余孔位;洗涤步骤充分,去除未结合杂蛋白;读数需快速完成,避免颜色衰减。
关键注意事项:

实验前需仔细阅读对应试剂盒的说明书,不同试剂盒的孵育时间、加样量可能存在差异
所有试剂需按要求储存,未用完的试剂需密封后放回规定温度(通常2-8℃或-20℃)
避免试剂污染,不同组分的移液器枪头需分开使用
洗板时需确保每孔都被洗涤液覆盖,防止出现假阳性结果
显色过程需避光,避免阳光直射影响结果
实验步骤如下:

试剂盒组分室温静置 24min,浓缩洗涤液 1:20 稀释,大鼠肠道冲洗液室温避光处理。
酶标板各微孔加入 100μL sIgA 梯度标准品、冲洗液、空白缓冲液。
一步混合酶工作液 100μL / 孔,密封 37℃孵育 56min。
洗涤浸泡 27s,洗 3 次,吸干微孔水分。
避光显色底物 100μL,37℃显色 13min。
终止液混匀微孔液体。
450nm 读取 OD 值,定量大鼠 sIgA 免疫球蛋白含量。
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