本试剂盒依托双抗体夹心ELISA原理，酶标板包被大鼠CaN特异性抗体，加入梯度标准品及待测大鼠细胞样本，样本中的CaN抗原被固相抗体特异性捕获，洗涤去除未结合物质，加入酶标记的CaN检测抗体，形成稳定的特异性免疫复合物，再次洗板后加入TMB底物显色，终止显色后测定吸光度，对照标准曲线定量测定样本中CaN的含量。
基本参数：
产品名称：大鼠钙调磷酸酶(CaN)ELISA试剂盒
英文名称：CaN ELISA Kit
货号：Y-E1076
规格：48T/96T
灵敏度：最低检测灵敏度0.08ng/mL，可精准检测大鼠免疫组织、肾组织中微量CaN
检测范围：0.12ng/mL～14ng/mL，覆盖大鼠免疫调节、肾损伤模型CaN浓度区间
反应时间：总实验时长110分钟，孵育80分钟，显色30分钟
保存条件：全套试剂2～8℃避光冷藏，严禁冷冻，防止酶蛋白变性
有效期：未拆封有效期6个月，开封后28天内用完
显色系统：高灵敏TMB显色体系，适配微量酶蛋白检测，显色清晰
检测波长：450nm主波长，570nm校正波长
标准曲线绘制：7梯度标准浓度，四参数拟合，R²≥0.993
特异性：专一结合大鼠钙调磷酸酶，与磷酸酶家族其他亚型无交叉反应
重复性：板内CV≤4.6%，板间CV≤6.6%
注意事项：样本避免反复冻融，防止CaN蛋白失活；孵育过程保持恒定湿度；试剂无浑浊、沉淀方可使用；读数严格控制在终止后20分钟内完成。
储存与有效期：
未开封整套试剂盒：2～8℃避光冷藏，禁止冷冻；有效期 12 个月。
开封后保存
剩余酶标板条：自封袋密封，内置干燥剂 2～8℃避光；1 个月内用完。
HRP 酶结合物、TMB 底物：避光 2～8℃，避免光照失效。
浓缩洗涤液：2～30℃常温保存，结晶温水溶解不影响效果。
复溶后标准品：分装 - 20℃冻存，避免反复冻融，1 个月内使用。
过期试剂禁止使用。
实验步骤如下：
试剂盒试剂室温静置 34min，洗涤缓冲液 1:26 稀释，大鼠淋巴细胞裂解上清避光低温保存。
酶标板各微孔加入 100μL CaN 标准蛋白、淋巴细胞上清、空白稀释液。
酶偶联二抗 100μL / 孔，封板 37℃孵育 87min。
洗涤浸泡 40s，洗涤 5 次，彻底吸干微孔残留洗液。
避光显色液 100μL，室温显色 21min。
硫酸终止液中和显色体系，摇匀微孔液体。
酶标仪测 OD450，定量钙调磷酸酶 CaN 浓度。
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