本试剂盒采用双抗体夹心ELISA检测原理,固相载体固定大鼠CAM特异性捕获抗体,加入标准品与待测大鼠生物样本,样本中的CAM抗原与固相抗体特异性结合,洗板清除非特异性杂质,加入辣根过氧化物酶标记的CAM检测抗体,形成夹心免疫复合物,充分洗涤后底物显色,显色深浅与CAM含量正相关,终止反应后通过标准曲线精准定量。
基本参数:

产品名称:大鼠钙调素(CAM)ELISA试剂盒
英文名称:CAM ELISA Kit
货号:Y-E1132
规格:48T/96T
灵敏度:最低检测限0.06ng/mL,为高灵敏度检测试剂盒,可检测极低浓度大鼠CAM蛋白
检测范围:0.1ng/mL~9ng/mL,适配大鼠各类组织钙信号相关模型检测
反应时间:总时长90分钟,抗体孵育60分钟,显色30分钟,实验周期短
保存条件:2~8℃避光冷藏,所有组分密封保存,防止挥发、污染
有效期:原装有效期6个月,开封后25天内使用完毕
显色系统:增强型TMB显色系统,反应快速、显色稳定
检测波长:450nm单一精准检测波长
标准曲线绘制:6梯度标准品,四参数拟合,R²≥0.997,精度极高
特异性:特异性识别大鼠钙调素,无物种交叉反应,无同源蛋白干扰
重复性:板内CV≤3.2%,板间CV≤5.2%,重复性极佳
注意事项:实验器具无钙污染,避免干扰检测结果;样本上清需清澈无杂质;温育温度精准控制;试剂避免长时间室温放置。
试剂盒组成:

预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原,结合目标物
标准品 6支/套 制备标准曲线,定量检测依据
生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物,提供酶结合位点
辣根过氧化物酶(HRP)标记亲和素 1瓶 与生物素结合,催化底物显色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物,产生颜色变化
终止液 1瓶 终止酶促反应,稳定显色结果
浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板,去除未结合物质
封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发
实验步骤如下:

试剂盒组分室温平衡 28min,洗涤液 1:21 稀释,大鼠心肌组织匀浆冰浴避光操作。
微孔板设置 CAM 梯度标准孔、心肌样本孔、空白对照孔,每孔 100μL 液体。
一步混合酶抗体液 100μL 每孔,覆膜 37℃孵育 65min。
洗涤浸泡 32s,洗 4 次,吸干微孔水分。
避光显色底物 100μL,37℃显色 15min。
终止液混匀微孔液体。
450nm 检测 OD,计算大鼠钙调素 CAM 蛋白含量。
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