竞争抑制 ELISA 检测原理,微孔板包被 GABA 偶联固相抗原,样本游离 GABA 与板上抗原竞争结合酶标记抗 GABA 抗体,洗涤后底物显色,OD 值随样本 GABA 浓度升高而降低,依据标准曲线反向定量脑组织 / 体液 GABA 含量。
产品参数:
产品名称 | 大鼠γ氨基丁酸(GABA)ELISA试剂盒 | 货号 | Y-E1329 |
英文名称 | GABA ELISA Kit | 规格 | 48T/96T |
灵敏度:最低检测灵敏度≤0.05μmol/L
检测范围:0.1μmol/L - 10μmol/L
反应时间:样本孵育90分钟,二抗孵育60分钟,避光显色20分钟
保存条件:试剂盒2-8℃冷藏,底物液、终止液避光单独保存,禁止冷冻
有效期:未开封有效期6个月,开封后1个月内用完
显色系统:高灵敏度TMB显色体系,显色均匀、稳定性强
检测波长:450nm检测,620nm校正背景
标准曲线绘制:以标准品梯度浓度为X轴,吸光度OD值为Y轴,四参数拟合生成标准曲线,计算样本GABA含量
特异性:专一识别大鼠GABA分子,与谷氨酸、甘氨酸等神经递质无交叉反应,特异性极强
重复性:板内变异系数≤6%,板间变异系数≤8%,重复性优异
注意事项:1. 脑组织、血清样本需低温离心处理,避免杂质干扰;2. 全程避免强光直射,防止底物降解;3. 加样精准快速,减少孔间反应误差;4. 废弃试剂按实验室危废规范处理。
关键注意事项:
本试剂盒仅科研体外检测,严禁临床诊断使用。
全程避免试剂、板条强光直射,TMB 见光易失效。
移液器吸头一次性使用,杜绝交叉污染;所有操作无酶、无热源。
孵育温度严格控制 37℃,温度偏低会降低 OD 值、灵敏度下降。
洗板必须充分,残液会造成非特异性结合,背景偏高。
终止后需快速读数,放置过久吸光度会漂移,结果失真。
终止液含稀硫酸,避免接触皮肤、眼睛,若不慎接触大量清水冲洗。
实验废弃物按生物安全废弃物规范处理。
不同批次试剂盒组分不可混用。
试剂盒运输全程 2~8℃冷链,严禁高温暴晒。
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实验操作流程:
试剂平衡:试剂盒室温平衡 22min,20 倍洗涤液稀释,拆分酶标板。
标准品稀释:GABA 标准品溶解配置 6 组梯度,空白零孔单独设置。
样本上样:标准孔 50μL 标准液,脑组织匀浆、脑脊液样本 50μL 上样。
孵育反应:每孔 50μL HRP 标记 GABA 抗体,封膜 37℃避光孵育 59min。
洗板:洗涤液浸泡 30s,拍干,洗板 5 次。
显色:TMB 底物各 50μL,避光 37℃反应 14min。
终止检测:终止液混匀,8min 内 450nm 读数,计算 GABA 浓度。
关键字: 大鼠γ氨基丁酸;GABA;ELISA试剂盒;
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