双抗体夹心酶联免疫吸附法,微孔板包被抗大鼠 IFN-γ 捕获抗体,细胞上清、血清样本中的 IFN-γ 特异性结合固相抗体,洗板后加入 HRP 标记抗 IFN-γ 检测抗体形成夹心复合物,TMB 显色读数,标准曲线定量 IFN-γ 表达量。
产品参数:
产品名称 | 大鼠γ干扰素(IFN-γ)ELISA试剂盒 | 货号 | Y-E1657 |
英文名称 | IFN-γ ELISA Kit | 规格 | 48T/96T |
灵敏度:最低检测灵敏度≤1pg/mL
检测范围:2pg/mL - 200pg/mL
反应时间:温育120分钟,洗板后二抗反应60分钟,避光显色15分钟
保存条件:2-8℃避光冷藏保存,严禁冷冻、高温放置,抗体组分密封防潮
有效期:原装试剂盒有效期6个月
显色系统:TMB底物显色,硫酸终止液终止反应,颜色由蓝变黄
检测波长:450nm读取吸光度值
标准曲线绘制:标准品倍比稀释,测定各浓度OD值,四参数拟合绘制标准曲线,精准计算样本浓度
特异性:特异性识别大鼠IFN-γ,与大鼠IFN-α、IFN-β及其他细胞因子无交叉反应
重复性:板内CV≤8%,板间CV≤10%,检测结果稳定可靠
注意事项:1. 细胞上清、血清样本避免反复冻融;2. 温育过程保证恒温,避免温度波动影响反应;3. 洗板彻底,防止残留造成本底偏高;4. 试剂平衡至室温后再进行实验操作。
储存与有效期:
未开封整套试剂盒:2~8℃避光冷藏,禁止冷冻;有效期 12 个月。
开封后保存
剩余酶标板条:自封袋密封,内置干燥剂 2~8℃避光;1 个月内用完。
HRP 酶结合物、TMB 底物:避光 2~8℃,避免光照失效。
浓缩洗涤液:2~30℃常温保存,结晶温水溶解不影响效果。
复溶后标准品:分装 - 20℃冻存,避免反复冻融,1 个月内使用。
过期试剂禁止使用。
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实验操作流程:
试剂平衡:试剂盒室温放置 30min,洗涤液 1:20 稀释,底物全程避光保存。
标准品制备:IFN-γ 冻干标准品溶解梯度稀释 7 个梯度,双复孔消除误差。
加样:标准孔 50μL 标准品,免疫细胞上清样本 50μL 加入检测孔。
酶标抗体孵育:每孔 50μL HRP-IFNγ 抗体,密封 37℃避光孵育 72min。
洗板:洗涤液浸泡 40s,拍干,洗板 6 次。
显色:底物 A、B 各 50μL,避光 37℃显色 21min。
终止读数:终止液混匀,10min 内 450nm 测 OD 值,计算 IFN-γ 含量。
关键字: 大鼠γ干扰素;IFN-γ;ELISA试剂盒;
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