双抗体夹心酶联免疫吸附原理,微孔板预包被抗大鼠 IFN-α 捕获抗体,样本分泌型 IFN-α 特异性结合固相抗体,洗涤后加入 HRP 标记抗 IFN-α 检测抗体构建夹心免疫复合物,TMB 显色读数,标准曲线定量 IFN-α 表达量。
产品参数:
产品名称 | 大鼠α干扰素(IFN-α)ELISA试剂盒 | 货号 | Y-E1251 |
英文名称 | IFN-α ELISA Kit | 规格 | 48T/96T |
灵敏度:最低检测灵敏度≤1.0pg/mL
检测范围:2pg/mL - 700pg/mL
反应时间:总反应时长150分钟(60分钟样本温育+30分钟二抗温育+30分钟显色)
保存条件:2-8℃避光冷藏,细胞因子试剂低温保存,避免降解
有效期:未开封试剂盒12个月
显色系统:高灵敏度TMB显色体系
检测波长:450nm
标准曲线绘制:梯度标准品OD值四参数拟合曲线,精准定量IFN-α浓度
特异性:特异性识别大鼠IFN-α,与IFN-β、IFN-γ无交叉反应
重复性:板内CV≤6%,板间CV≤8%
注意事项:细胞上清、血清样本低温采集分装,避免反复冻融;温育密封避光,防止细胞因子失活。
关键注意事项:
实验前需仔细阅读对应试剂盒的说明书,不同试剂盒的孵育时间、加样量可能存在差异
所有试剂需按要求储存,未用完的试剂需密封后放回规定温度(通常2-8℃或-20℃)
避免试剂污染,不同组分的移液器枪头需分开使用
洗板时需确保每孔都被洗涤液覆盖,防止出现假阳性结果
显色过程需避光,避免阳光直射影响结果
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实验操作流程:
试剂平衡:试剂盒室温放置 29min,浓缩洗涤液 1:20 稀释,全程避光保存底物。
标准品制备:IFN-α 标准品溶解后梯度稀释 7 个梯度,空白孔独立设置。
加样:标准孔 50μL 标准液,细胞培养上清样本 50μL 上样。
酶标抗体孵育:每孔 50μL HRP-IFNα 抗体,密封 37℃避光孵育 70min。
洗板:洗涤液浸泡 39s,拍干,洗板 6 次。
显色:底物 A、B 各 50μL,避光 37℃显色 20min。
终止读数:终止液混匀,10min 内 450nm 测 OD 值,计算 IFN-α 浓度。
关键字: 大鼠α干扰素;IFN-α;ELISA试剂盒;
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