双抗体夹心 ELISA 法,微孔板固定抗大鼠 IL-1α 特异性捕获抗体,样本 IL-1α 抗原仅与对应捕获抗体结合,洗板后加入 HRP 标记抗 IL-1α 检测抗体形成夹心复合物,TMB 显色读数,单独定量 IL-1α 蛋白水平。
产品参数:
产品名称 | 大鼠白介素1α(IL-1α)ELISA试剂盒 | 货号 | Y-E1652 |
英文名称 | IL-1伪 ELISA Kit | 规格 | 48T/96T |
灵敏度:最低检测灵敏度≤2pg/mL
检测范围:4pg/mL - 290pg/mL
反应时间:恒温孵育120分钟,酶标二抗反应60分钟,避光显色15分钟
保存条件:2-8℃避光冷藏,试剂密封保存,严禁冷冻
有效期:原装未拆封有效期6个月
显色系统:TMB双组分显色系统
检测波长:450nm检测吸光度
标准曲线绘制:标准品梯度稀释,检测对应OD值,四参数拟合绘制标准曲线,计算IL-1α浓度
特异性:特异性识别大鼠IL-1α,不与IL-1β及其他细胞因子交叉反应
重复性:板内CV≤8%,板间CV≤10%
注意事项:1. 区分IL-1α与IL-1β检测体系,试剂不可混用;2. 样本无溶血、无浑浊;3. 严格控制孵育温度时间;4. 实验全程规范操作避免污染。
关键注意事项:
实验前需仔细阅读对应试剂盒的说明书,不同试剂盒的孵育时间、加样量可能存在差异
所有试剂需按要求储存,未用完的试剂需密封后放回规定温度(通常2-8℃或-20℃)
避免试剂污染,不同组分的移液器枪头需分开使用
洗板时需确保每孔都被洗涤液覆盖,防止出现假阳性结果
显色过程需避光,避免阳光直射影响结果
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实验操作流程:
试剂平衡:全部试剂室温放置 27min,浓缩洗涤液 1:20 稀释备用。
标准品配制:IL-1α 冻干标准品充分溶解,梯度稀释 7 个浓度梯度。
加样:标准孔 50μL 标准品,上皮细胞、损伤组织匀浆 50μL 加入检测孔。
酶抗体孵育:每孔 50μL HRP-IL-1α 特异性抗体,密封 37℃避光孵育 68min。
洗板:洗涤液浸泡 38s,拍干,洗板 6 次。
显色:底物 A、B 各 50μL,避光 37℃显色 19min。
终止读数:终止液摇匀,9min 内 450nm 检测,计算 IL-1α 含量。
关键字: 大鼠白介素1α;IL-1α;ELISA试剂盒;
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