双抗体夹心酶联免疫吸附法,微孔板预包被抗大鼠 IL-1sRⅡ 特异性捕获抗体,样本 IL-1sRⅡ 蛋白吸附于微孔,洗除游离组分后加入酶标记抗 IL-1sRⅡ 检测抗体构建夹心结构,TMB 显色测吸光度,标准曲线定量可溶性受体 Ⅱ 水平。
产品参数:
产品名称 | 大鼠白介素1可溶性受体Ⅱ(IL-1sRⅡ)ELISA试剂盒 | 货号 | Y-E1487 |
英文名称 | IL-1sRⅡ ELISA Kit | 规格 | 48T/96T |
灵敏度:最低检测灵敏度≤0.25ng/mL
检测范围:0.5ng/mL - 60ng/mL
反应时间:恒温孵育120分钟,酶标二抗反应60分钟,避光显色15分钟
保存条件:2-8℃避光冷藏保存,严禁冷冻、高温放置
有效期:未开封有效期6个月
显色系统:优化型TMB显色系统,背景干扰极低
检测波长:450nm主波长检测
标准曲线绘制:倍比稀释标准品,测定OD值,四参数拟合绘制标准曲线,换算IL-1sRⅡ浓度
特异性:专一识别大鼠IL-1sRⅡ,不与IL-1sRⅠ及其他可溶性受体交叉反应
重复性:板内CV≤7%,板间CV≤9%
注意事项:1. 严格区分受体Ⅰ、Ⅱ检测试剂盒,禁止混用;2. 血清样本需预处理去除杂质;3. 全程避光显色;4. 剩余试剂密封妥善保存。
关键注意事项:
本试剂盒仅科研体外检测,严禁临床诊断使用。
全程避免试剂、板条强光直射,TMB 见光易失效。
移液器吸头一次性使用,杜绝交叉污染;所有操作无酶、无热源。
孵育温度严格控制 37℃,温度偏低会降低 OD 值、灵敏度下降。
洗板必须充分,残液会造成非特异性结合,背景偏高。
终止后需快速读数,放置过久吸光度会漂移,结果失真。
终止液含稀硫酸,避免接触皮肤、眼睛,若不慎接触大量清水冲洗。
实验废弃物按生物安全废弃物规范处理。
不同批次试剂盒组分不可混用。
试剂盒运输全程 2~8℃冷链,严禁高温暴晒。
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实验操作流程:
试剂平衡:试剂盒室温复温 23min,20× 洗涤液蒸馏水稀释,酶结合物混匀。
标准品稀释:IL-1sRⅡ 冻干标准品溶解配置 6 个梯度,现配现用。
样本上样:标准孔 50μL 梯度标准液,血浆、免疫细胞上清 50μL 上样。
酶结合物孵育:每孔 50μL HRP 标记 sRⅡ 抗体,封膜 37℃避光孵育 61min。
洗板:洗涤液浸泡 32s,拍干,循环洗板 5 次。
显色:TMB 底物各 50μL,避光 37℃孵育 15min。
终止检测:终止液混匀,7min 内 450nm 读数,换算 IL-1sRⅡ 浓度。
关键字: 大鼠白介素1可溶性受体Ⅱ;IL-1sRⅡ;ELISA试剂盒;
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